扶正口服液通过STAT3-RORγt信号通路对胃癌小鼠Th17细胞的调控作用
2021-05-12王理槐孙银辉
王理槐 孙银辉



【关键词】胃癌;扶正口服液;信号转导与转录激活因子3;维甲酸相关核孤儿受体γt;辅助性T细胞17
近年来,有关胃癌患者其辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)、信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)及维甲酸相关核孤儿受体γt(retinoid-related orp han nuclear receptor γt,RORγt)表达增加的报道相继涌现[1-2]。基础研究亦证实了白细胞介素-17(IL-17)具有较强促瘤作用,IL-17抑制剂或可成为胃癌治疗的新思路[3]。扶正口服液是我院肿瘤科长期临床探索中研制而成的院内制剂,该方以李东垣“补脾胃、泻阴火”学说为指导,具有健脾益气、活血散结之功。本研究基于本院采用扶正口服液辅助治疗胃癌的确切疗效,研究扶正口服液通过STAT3-RORγt信号通路调控胃癌荷瘤小鼠Th17细胞分化的作用机制。
1 材料与方法
1.1 实验动物及药物
SPF级KM小鼠50只,雌雄各半,体重18~22 g,6~8周龄,购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司。动物使用符合我校《实验动物管理规定》。
扶正口服液每1000 mL含:莪术220 g、生丹参147 g、当归147 g、黄连44 g、蒲公英440 g、白花蛇舌草440 g、党参147 g、蜜麸炒白术147 g、生甘草88 g、制半夏147 g、陈皮88 g、白茯苓176 g。将扶正口服液以生理盐水稀释至0.45 g/ mL,根据换算系数,小鼠等效給药量为0.2 mL/10 g,并依此设置低剂量、中剂量、高剂量(0.1 mL/10 g、0.2 mL/10 g、0.4 mL/10 g)。
1.2 实验方法
1.2.1 细胞培养
将人胃癌细胞株SGC-7901置于含10%灭活胎牛血清(FBS)、100 U/mL青霉素和100 μg/mL链霉素的DMEM培养液中,细胞单层贴壁生长至80%~90%融合时以0.25%胰蛋白酶消化,按1∶3传代,于37℃、5%CO2、湿度合适的细胞培养箱中培养。
1.2.2 动物造模
取对数生长期的人胃癌SGC-7901细胞株,在无菌条件下分别用0.25%胰蛋白酶消化制备成3×107个/mL细胞悬液,以0.1 mL/只接种于50只裸小鼠右侧腋窝下。……
