王 璨，王保和，黄宇虹，李自强，张 涵

UPLC-MS/MS同时测定大鼠血浆中热毒宁注射液13个潜在质量标志物及其药动学研究

王 璨1，王保和2*，黄宇虹2，李自强2*，张 涵1

1. 天津中医药大学，天津 301617 2. 天津中医药大学第二附属医院，天津 300250

基于中药质量标志物（quality marker，Q-Marker）概念，采用超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）方法建立同时测定血浆中热毒宁注射液13个潜在Q-Marker含量的方法，并用于大鼠体内血药浓度测定及药动学研究，以证明其体外-体内传递过程的可测性。采用Waters AQUITY UPLC C18色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm），流动相为0.1%甲酸水-乙腈梯度洗脱，体积流量0.3 mL/min；柱温为35 ℃，自动进样器温度为4 ℃；进样量为2 μL。以氯霉素为内标，采用电喷雾离子源（ESI），负离子源，多反应离子检测（multiple reaction monitoring，MRM）模式，同时定量血浆中13个Q-Marker（栀子苷、京尼平苷酸、京尼平龙胆双糖苷、山栀苷、绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、4,5-二--咖啡酰奎宁酸、裂环氧化马钱子苷、裂环马钱子酸、獐牙菜苷）含量。采用Phoenix WinNonlin8.1软件非房室模型计算药动学参数。13个化合物在检测范围内线性关系良好。大鼠血浆中内源性物质不干扰测定，该方法回收率、基质效应、精密度、准确度和稳定性均符合生物样品的测定要求。尾iv热毒宁注射液后在大鼠血浆中可检测到上述13个化合物，裂环马钱子酸在血浆中暴露量最大，栀子苷和绿原酸次之。各化合物在体内半衰期较短，消除速率快；表观分布容积提示所有化合物呈广泛组织分布。该方法可以同时定量血浆中热毒宁注射液的13个成分，证明了上述成分体外-体内传递过程的可测性；……