陈杰

胆管癌(cholangiocarcinoma，CCA)是一种起源于胆管上皮细胞的高度恶性肿瘤。近年来，全球CCA发病率和死亡率不断上升[1]。早期侵袭转移是CCA的主要特征，确诊后平均生存期低于24个月[2]。尽管化疗在一定程度上改善了CCA治疗现状，但CCA患者5年存活率仅为30%左右[3]。因此，迫切需要了解CCA发生和转移的分子机制，寻求新的诊断和治疗方法。长链非编码RNA(long non-coding RNA，LncRNA)是一类缺乏编码功能性蛋白功能的RNA分子，虽然最初被认为是转录噪声，但有研究表明LncRNA在细胞中呈高度特异性表达，具有改变恶性肿瘤细胞增殖、侵袭和转移能力的强大功能[4]。ZFPM2反义RNA1(ZFPM2 antisense RNA1，ZFPM2-AS1)是由ZFPM2基因座DNA反义链衍生而来的lncRNA，ZFPM2-AS1高表达与肺癌[5]、胃癌[6]、肝癌[7]的发生和转移有关，是一种潜在的诊断和预后生物标志物以及治疗靶点。然而，ZFPM2-AS1在CCA中的表达模式和潜在功能作用尚不清楚。本研究揭示ZFPM2-AS1在胆管癌中的表达模式，并探讨了其作为CCA治疗靶点的可行性。

1 材料与方法

1.1 细胞株 人胆管上皮细胞HIBEpic、人胆管癌细胞HuCCT1、人胆管癌细胞RBE购于上海通派生物科技有限公司；人胆管癌细胞TFK1细胞购自上海雅吉生物科技有限公司。

1.2 主要试剂 DMEM培养基、RPMI-1640培养基、胎牛血清购于美国Hyclone公司；LipofectamineTM 2000购于北京宜科思源科技有限公司；青链霉素溶液、Trizol试剂、四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium，MTT)试剂、二甲基亚砜均购自北京索莱宝生物技术有限公司；Transwell小室和基质胶购于北京优尼康生物科技有限公司；兔源细胞周期素D1(CyclinD1)抗体、兔源基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2，MMP-2)抗体、兔源MMP-9抗体、兔源β-actin抗体、山羊抗兔IgG二抗购自武汉爱博泰克生物科技有限公司；……