杨俊寒， 段海潇， 张紫怡， 王润杨， 刘滨磊， 胡 翰， 汪 洋

(湖北工业大学生物工程与食品学院， 湖北 武汉 430068)

结直肠癌作为消化道的恶性肿瘤之一，死亡率位居所有癌症第4位[1]，在中老年人群中发病率极高，且每年发病率都有增加。遗憾的是，有1/5的结直肠癌患者在病情确诊时都伴随远处转移，而该类患者5年生存率仅为12%。结直肠癌的治疗方法主要分为三大类：首先是外科手术治疗，即通过手术切除肿瘤，但是通过该方法进行治疗方法通常不够彻底，无法根除肿瘤；其次是放疗和化疗，这种疗法虽然可以有效针对肿瘤细胞，但是它们对机体正常细胞也会产生较大伤害；最后就是近年来受到研究者青睐的肿瘤免疫治疗，其能重新启动并维持患者自身免疫系统对肿瘤细胞的识别和杀伤，诱导机体慢慢恢复其抗肿瘤免疫反应。肿瘤免疫治疗不仅效果好，而且避免了治疗过程中对机体的二次损伤。但由于CT26细胞不带任何标记，在研究肿瘤细胞成瘤和病灶转移的过程中无法对其进行有效观察及检测。因此需要通过某些手段对其进行标记，且能通过仪器对标记进行捕捉和记录。肿瘤免疫治疗中常用的一项技术——生物发光分析法标记生物，正好解决这一问题。

萤火虫荧光素酶(Firefly luclferase，Fluc)是生物发光中研究最为深入、透彻的发光系统。其发光机制是荧光素酶与底物在Mg2+的作用下反应形成的腺昔酸荧光素酞化复合物， 能够与酶结合且经过氧化脱梭作用即转化至激活状态的氧化荧光素，最后发射光子[2]。……