吴沙沙 牟大超 缪治永 焦 令 周 轶

当前，由于环境污染、生活方式改变、病原体感染等因素，肿瘤已成为成为人类死亡的最大致病因素，严重影响着人类健康和经济发展[1-3]。随着基础免疫学的发展和对肿瘤认识的深入，肿瘤免疫治疗已成为继手术治疗、放疗和化疗后的有效治疗手段[4-5]。早在20世纪初，Leyden和Blumenthal就应用肿瘤疫苗进行了特异性免疫治疗[6]。随着20世纪40年代肿瘤特异性抗原(TSA)的发现和众多免疫检查点抑制剂的发现，奠定了肿瘤免疫学基础[7-8]。

肿瘤的免疫疗法发展至今已有众多技术手段，大体可分为过继免疫细胞疗法和抗体靶向治疗，以及肿瘤疫苗等[9-12]。其中过继免疫细胞治疗包括CAR-T、CAR-NK、DC治疗等[13]。抗体靶向治疗包括PD-1、PD-L1、CTLA4等[14-15]。肿瘤疫苗包括肿瘤全细胞疫苗、DC疫苗、CTL表位疫苗，以及靶向肿瘤新生血管疫苗等。2014年日本和美国FDA先后批准PD-1抗体用于治疗晚期黑色素瘤。研究发现肿瘤细胞高表达PD-L1，结合淋巴细胞膜上PD-1后能抑制B细胞和T细胞的增殖，发生肿瘤免疫逃逸[16]。因此，给予PD-1或PD-L1抗体治疗，在体内竞争性结合，通过阻断T细胞的抑制信号，从而达到治疗肿瘤的目的[17]。RAW264.7属小鼠巨噬细胞系，是白血病毒诱导产生的肿瘤细胞，可表达PD-1。本课题旨在研究我科室制备的RAW264.7细胞蛋白和PD-L1抗体对于小鼠黑色素瘤(B16)的抑瘤效果。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 细胞与动物 B16黑色素瘤细胞由四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室杨寒朔教授惠赠，本室保种传代。小鼠巨噬细胞Raw264.7由四川大学华西医院公共实验技术中心提供，本室传代保种。……