唐咸玉，孙 璐，何 柳，曾慧妍，何嘉莉，谢雯雯，朱胜伶

(广东省中医院，广州 510120)

我国超重人群中2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)患病率高于美国(15.45% vs. 8%～9%)[1]，糖尿病合并肥胖存在的糖脂代谢紊乱可启动内质网应激，导致胰岛β细胞凋亡[2]，加速糖尿病的进展。改善糖脂代谢、抑制糖脂毒性诱导的内质网应激、减少β细胞凋亡可能成为防治肥胖T2DM的新途径。中医认为，此类患者的主要病机为脾肾阳虚、枢机不利、痰瘀内阻。前期临床研究证实，运用具有“温补脾肾之阳，和畅枢机”功用的固本畅枢法可改善肥胖T2DM 患者胰岛素抵抗(Insulin resistance，IR)，减轻其体质量及临床症状[3]。本研究复制肥胖糖尿病大鼠模型，通过体内实验了解固本畅枢法对模型大鼠糖脂代谢的影响，以及胰腺β细胞凋亡时典型的形态学改变；通过体外培养小鼠胰岛β细胞MIN6，采用流式细胞术定量分析β细胞凋亡情况。本文运用生物化学、形态学与定量分析相结合，旨在进一步研究固本畅枢法对胰岛β细胞凋亡的干预作用。

1 材料与方法

1.1 动物及饲养

无特定病原体动物(specific pathogen free，SPF)级成年雄性sprague-dawley(SD)大鼠，体质量140～160 g共40只，购自广东省医学实验动物中心，许可证号SCXK(粤)2013-0002，实验动物伦理学批准号2016054。SPF组鼠料为广东省医学实验动物中心供应(饲料合格证号0082700)。高脂高糖饲料由北京博爱港公司提供，组分包括玉米、猪油、蔗糖、胆固醇、豆粕、小麦麸、次粉、鱼粉、麻油、大豆油、磷酸氢钙、石粉、胆酸钠、赖氨酸、食盐、氯化胆碱、多种维生素及矿物元素。维持料65%+猪油10%+蔗糖20%+胆固醇2.5%+胆酸钠1%+混调剂(鸡蛋麻油花生)1.5%。……