汪海英 孟丹

(神木市医院;1.科教科;2.妇科,陕西 榆林 719300)

人乳头状瘤病毒是一种双链嗜上皮无包膜的小DNA病毒，属乳多空病毒科，在人和动物中分布广泛[1]。然而地区不同，HPV的人群感染率不同，优势型别也不同。并且现有的疫苗对其它型别的交叉预防能力有限，因此特定地区的HPV流行病学资料的获得很有必要[2-6]。为研究榆林地区女性感染HPV情况，收集我科自2015年至2019年女性宫颈HPV检测病例，探讨本地区女性HPV感染率及感染亚型分布。报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 收集2015.2至2019.2来我院就诊，有性生活史，自愿接受宫颈HPV检测的女性共30 000例，者均无其他宫颈疾病，其中年龄20～72岁，平均(49.23±4.14)岁。患者均未进行过宫颈手术及盆腔放疗，且非月经期。

1.2方法 (1)石蜡切片：将宫颈腺癌及正常宫颈石蜡组织标本切片3～5片，4 μm厚度，不同石蜡组织切片前对刀片进行消毒。(2)提取DNA，将各组织切片置入高速冷冻离心机(德国eppendorf5810R)离心，加入150μL裂解液，充分混匀，金属浴(100℃，10 min)，13 000 r/min，10 min后取中层溶液待用。(3)PCR扩增：使用基因扩增仪(新加坡Gene amp pcr system 2400)扩增，将PCR反应管，经4 s离心后，编号，加入不同物质和空白对照，离心，扩增。(4)杂交、孵育、染色：取离心管，贴上标签，加入膜条，置入A液及相关PCR产物，盖紧管盖，沸水浴10 min，置入分子杂交仪(江苏兴化分析仪器厂)1.5h，取50 ml离心管，置入B液，预热，将杂交箱中离心管液体置入B液离心管，洗涤5 min，移至孵育液孵育，室温，30 min，A液洗涤2次，共10 min，使用C液洗涤2 min；加入显色液显色30 min，移至去离子水浸泡，观察。使用人乳头状瘤病毒基因分型检测试剂盒(亚能生物技术有限公司)检测基因分型。……