吴 昊，阎红琳，袁静萍

严重急性呼吸综合征冠状病毒-2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2, SARS-CoV-2)感染引起的新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019, COVID-19)在全球范围内持续蔓延。根据血清型和基因组特点，冠状病毒亚科被分为α、β、γ和δ四个属，SARS-CoV-2是一种属于β属的新型冠状病毒[1]。在某些病毒感染的细胞内，用普通光镜可看到大小和数量都不同的圆形或不规则小体，称为病毒包涵体，可用特殊的病毒包涵体染色法明确有无病毒感染。笔者通过查阅资料使用改良亚甲基蓝碱性品红染色法显示COVID-19肺组织中病毒包涵体，并经多次实验发现染色过程中对分化程度的掌握至关重要，现介绍如下。

1 材料与方法

1.1 临床资料在未充分认识SARS-CoV-2病毒感染的疫情早期，有2例患者在武汉大学人民医院接受了肺叶切除术，2例患者均在术后第1天显示淋巴细胞降低，其中1例患者有轻微咳嗽。2例患者流感病毒及其他病毒(乙肝梅丙艾)检测均呈阴性，分别于术后第4天和第6天经核酸检测确诊为COVID-19。回顾性分析患者术前CT示磨玻璃影的病毒性肺炎改变，推测2例患者在术前已感染SARS-CoV-2。因此收集2例患者剩余手术标本，全部取材，经10%中性缓冲福尔马林固定，常规脱水、透明、浸蜡、包埋、3 μm厚切片。石蜡组织切片SARS-CoV-2原位杂交检测为阳性，进一步证实患者术前已感染SARS-CoV-2[2]。本实验经武汉大学人民医院伦理委员会批准(WDRY2020-K005)。

1.2 方法采用改良亚甲基蓝碱性品红染色法标记病毒包涵体：(1)选取同一组织蜡块切片3张脱蜡至水；(2)在0.25%碱性品红中染色25 min；(3)水洗；(4)根据柠檬酸分化时间长短分为A、B、C三组。……