SPIN1通过调控上皮-间质转化促进胃癌细胞的迁移、浸润
2021-04-25吕蓓蓓刘海亭王亚文
吕蓓蓓,刘海亭,陈 旭,王亚文,宋 琳,高 鹏
胃癌是全球范围内最常见的恶性肿瘤之一,最新研究数据显示其病死率位居第3位[1]。由于其症状隐匿,难以早期发现,胃癌患者确诊时多已为中晚期,5年生存率不足20%,严重危害国民的身体健康。浸润与转移是导致胃癌患者死亡的主要原因。目前关于胃癌浸润、转移的分子机制仍不明确。SPIN1又名Spindlin1,是SPIN/SSTY基因家族的主要成员,1997年Oh等[2]首次报道其为从卵母细胞向胚胎过渡过程中在小鼠中表达的主要母体转录物,在配子发生中发挥重要作用。此外其还是一种Tudor结构域蛋白,能够识别组蛋白H3第四位赖氨酸甲基化(H3K4me3),通过与其结合从而影响表观遗传调控[3-4]。近年研究表明,SPIN1在多种人类恶性肿瘤如卵巢癌、肺癌、肝癌及乳腺癌中高表达[5-7],提示SPIN1可能是一个重要的癌基因,参与肿瘤的发生和发展。但迄今为止,SPIN1在胃癌中的表达水平、生物学功能和调控的分子机制仍不清楚,本文从细胞水平探究SPIN1对胃癌迁移、浸润的作用,并初步探究其可能的分子机制。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂本实验所用胃癌细胞株MKN45、BGC823、SGC7901、AGS及HGC27细胞购自中国科学院细胞库上海肿瘤研究所。细胞培养基(RPMI-1640)购自Invitrogen公司,胎牛血清FBS购自Gibco公司,胰蛋白酶、双抗、PBS干粉、DMSO购自索莱宝公司,细胞转染试剂Turbofect购自Thermo公司,细胞转染试剂X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent购自Roche公司,实时荧光定量PCR试剂盒购自Roche公司,Transwell小室购自美国Corning公司,Matrigel基质胶购自美国BD公司,引物购自济南博尚公司,SPIN1抗体购自Proteintech公司(19531-1-AP),vimentin、Zeb1、Zo-1、β-catenin、Snail、Slug、Claudin-1和β-actin单克隆抗体购自Santa Cruz公司。
1.2 方法……p>
