焦聿墨，马林通，王 鼎，赵 鹏*

(1.陕西省汉中市三二○一医院 血液科，陕西 汉中723000;2.汉中市南郑区人民医院 检验科)

急性B淋巴细胞白血病是临床上高发的儿童恶性肿瘤疾病，一般占儿童恶性肿瘤疾病发病率的20%以上，发病率近年来呈逐年增加的趋势[1-2]。急性B淋巴细胞白血病是急性白血病最常见的类型，但是由于该疾病涉及数十种特异染色体异位形成一种融合基因，而多种融合基因也导致了急性B淋巴细胞白血病发病机制的复杂性，从而给临床医师治疗形成了巨大的困难[3-4]。本次研究分析伴有髓系抗原标记的儿童急性B淋巴细胞白血病患者血液形态学、流式免疫表型特点，为临床医师治疗急性B淋巴细胞白血病患儿提供理论依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2014年8月至2019年8月于三二○一医院接受治疗的60例儿童急性B淋巴细胞白血病患者为研究对象，男性36例，女性24例；年龄5-12岁，平均年龄(8.24±1.19)岁；病程5个月-28个月，平均病程(14.38±2.17)月。纳入标准：①患儿经免疫学、分子生物学、细胞遗传学确诊为急性B淋巴细胞白血病；②患儿年龄在12岁以下；③患儿及其家属对本次研究知情并签署知情同意书。排除标准：①免疫性缺陷、系统性疾病患儿；②患儿有全身性感染性疾病；③个人原因中途退出研究患儿。本次研究经医院伦理委员会审核通过，符合相关伦理标准。

1.2 方法

1.2.1血液形态学检测方法 采用组织化学染色法进行染色，采用非特异性醋酸AS-D萘酚酯酶染色及氟化钠、绿醋酸AS-D萘酚酯酶染色，试剂均购于广州官洲生物技术有限公司；采用流式细胞仪(美国通用电气公司)对患儿血液进行检测，采用小鼠抗人IgG型抗体作为同型对比，检测过程严格按照临床检验标准进行。

1.2.2流式免疫表型检测方法 采用标本中原始细胞数≥30%或者幼稚细胞数≥30%的2 mL肝素抗凝骨髓对标本单个核细胞进行分离；另外采用免疫荧光法进行标记，检测过程严格按照临床检验标准进行；荧光标记采用藻红蛋白/异硫氰酸荧光素/CD45-PC5，抗体购于广州极光生物技术有限公司，B系列包括CD19、CD10、CD22、CD20、Lambda、Kappa、CD13、CD17、cyIgM、CD33、CD34、MPO、cyCD79a；T系列包括CD7、CD5、CD2、cyCD3。当检测结果显示髓系抗原阳性细胞≥20%、淋系抗原阳性细胞≥30%、干抗原阳性细胞≥20%、祖抗原阳性细胞≥20%、胞浆染色抗原阳性细胞≥10%则为阳性。

1.2.3观察指标 (1)B细胞抗原表达情况：统计阳性以及阴性B细胞抗原表达情况，指标包括CD10、CD79a、CD22、CD20、CD19，计算构成比。(2)髓系抗原阳性患儿细胞形态情况：统计细胞形态典型、细胞形态不典型类型CD抗原表达的关系。(3)骨髓原始、幼稚细胞形态情况：统计急性淋巴细胞白血病、急性髓细胞白血病、未诊断类型患儿CD抗原表达的关系。

1.2.4统计学方法 采用SPSS23.0软件对研究中得到数据进行统计学分析。两组计量结果比较采用t检验或Fisher精确概率检验，计数资料比较用χ2检验，P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 B细胞抗原在急性B淋巴细胞白血病患儿中的表达情况CD10急性B淋巴细胞白血病患儿阳性表达35例(58.33%)、阴性25例(41.67%)；CD79a阳性40例(66.67%)、阴性20例(33.33%)；CD22阳性27例(45.00%)、阴性33例(55.00%)；CD20阳性31例(51.67%)、阴性29例(48.33%)；CD19阳性50例(83.33%)、阴性10例(16.67%)。

2.2 髓系抗原阳性急性B淋巴细胞白血病患儿细胞形态与CD抗原表达CD13、CD117、CD33细胞形态典型与CD13、CD117、CD33细胞形态不典型差异不具有统计学意义(P>0.05，表中概率为Fisher精确概率)，见表1。

表1 髓系抗原阳性急性B淋巴细胞白血病患儿细胞形态与CD抗原表达

2.3 骨髓原始、幼稚细胞形态不典型急性B淋巴细胞白血病患儿细胞形态与CD抗原表达CD117急性淋巴细胞白血病表达显著高于CD117急性髓细胞白血病表达，CD33急性淋巴细胞白血病表达显著高于急性髓细胞白血病患儿表达，差异具有统计学意义(P<0.05)；CD13急性淋巴细胞白血病、急性髓细胞白血病表达差异不具有统计学意义(P>0.05)，见表2。

表2 骨髓原始、幼稚细胞形态不典型急性B淋巴细胞白血病患儿细胞形态与CD抗原表达

3 讨论

急性B淋巴细胞白血病是一种血液系统恶性肿瘤，急性B淋巴细胞白血病治疗效果、临床特征以及患儿预后结果差别较大，发病率近年来呈逐渐上升的趋势[5-6]。临床学者[7-8]认为影响急性B淋巴细胞白血病治疗效果的因素较多，其中年龄、性别、细胞免疫表型、染色体核型对患儿影响较大。急性B淋巴细胞白血病诊断较为复杂，临床学者[9-10]认为细胞形态学虽然诊断急性B淋巴细胞白血病有一定效果，但是随着诊断要求的不断提高细胞形态学诊断不能满足急性B淋巴细胞白血病的诊断。急性B淋巴细胞白血病幼稚和原始淋巴细胞在机体的造血组织中会发生无限增殖，破坏机体血液平衡，严重影响患者的身体健康[11-12]。目前诊断急性B淋巴细胞白血病主要应用免疫学、细胞形态学等，但是尚未有较为明确、统一的诊断标准，诊断效果存在差异，因此临床医师在诊断过程中可能出现漏诊、误诊的情况，严重影响患儿的治疗[13]。本次研究探讨伴有髓系抗原标记的儿童急性B淋巴细胞白血病患者血液形态学、流式免疫表型特点，为诊断、治疗急性B淋巴细胞白血病患儿提供参考结果。

本结果急性B淋巴细胞白血病患儿CD10、CD19a、CD22、CD20、CD19阳性表达，可能原因是急性髓细胞白血病在细胞形态学中具有小原始粒细胞的特点，能够观察到伪足；另外部分急性髓细胞白血病原始粒细胞形态变化较多，且细胞可能会出现瘤状突起，相对于原始单核细胞体积较大的情况更容易忽略[14]。急性淋巴细胞白血病CD117表达显著高于急性髓细胞白血病及未诊断患儿，未诊断患儿、急性淋巴细胞白血病患儿CD33表达显著高于急性髓细胞白血病患儿，差异具有统计学意义(P<0.05)；急性淋巴细胞白血病、急性髓细胞白血病、未诊断患儿CD13表达差异不具有统计学意义(P>0.05)，可能原因是原始粒细胞和原始淋巴细胞在骨髓细胞分类中具有容易辨认的特点，其中原始粒细胞和原始淋巴细胞的核仁、细胞浆、细胞核等均有明显不同，另外原始单核细胞可见胞浆颗粒，可见伪足，因此原始单核细胞不容易辨认，临床医师在诊断时极难判别[15]。

综上所述，急性B淋巴细胞白血病患儿伴髓系抗原表达骨髓细胞涂片检测中幼稚细胞形态、原始细胞形态存在异质性和多样性，与髓系抗原阴性的细胞形态存在一定差异，判断时存在较大难度，需要结合其他指标进行诊断。