李一鸣，陈 华，袁晓燕，郭东风

海军军医大学附属公利医院，上海 200135 1妇科；2 全科医学科

宫颈癌是常见的妇科肿瘤，是全世界女性，尤其是发展中国家女性肿瘤相关死亡的主要原因[1]。随着宫颈癌早期筛查、诊断技术和治疗手段的不断发展，近年来宫颈癌的发病率和死亡率有所降低，但宫颈癌患者的长期预后仍不容乐观[2]。微RNA(microRNA，miRNA)是一种小的非蛋白质RNA，由19 ～ 25个核苷酸组成，在许多与肿瘤恶性进展密切相关的生物学过程中发挥重要的调节作用[3-4]。miR-324-3P与多种恶性肿瘤密切相关，其可通过多种途径参与非小细胞肺癌、鼻咽癌和胃癌等恶性肿瘤的发生、发展，可起到促癌因子的作用，也可起到抑癌因子的作用[5-7]。miR-324-3P在宫颈癌中的表达未见相关报道。miRNA存在很多靶基因，其主要通过调控不同的靶基因发挥不同的生物学功能，如miR-324-3p通过靶向调控WNT2b在鼻咽癌中发挥抑癌作用[6]。WNT3a为经典的Wnt信号通路中的重要蛋白，与胃癌等恶性肿瘤的发生、发展密切相关，对细胞的分化成熟有重要作用[8]。本研究采用TargetScan7.1软件预测miR-324-3P可能的靶基因，分析miR-324-3P及其靶基因在宫颈癌患者组织中的表达情况及其对癌 细胞增殖、侵袭和转移的作用。

材料与方法

1 主要试剂和材料 Trizol试剂、PrimeScriptTMRT reagent Kit逆转录试剂盒和SYBR Premix EX TaqTMⅡqRT-PCR试剂盒，日本TaKaRa公司；miR-324-3P、WNT3a、内参GAPDH引物，上海生工生物工程有限公司合成；FBS、高糖培养基和胰酶，美国Giboc公司；宫颈癌细胞(HeLa细胞)，美国ATCC细胞库；过表达WNT3a质粒、pGLO-WNT3a-野生型质粒(WNT3a-wt)和pGLOWNT3a-突变型质粒(WNT3a-mut)，上海吉凯公司；双荧光素酶报道基因检测试剂盒，上海碧云天生物试剂有限公司；……