张丹

结肠癌发病早期症状无典型性，多数患者入院治疗时，已为晚期，错失最佳治疗时机。生物标志物检测是临床诊断结肠癌的常用方法，具有简单、方便、快捷的优势。临床常用的肿瘤标志物为癌胚抗原、糖类抗原199，但这些标志物的诊断阳性率低。近些年来，肿瘤M2 型丙酮酸激酶（M2-PK）已经成为医学界研究肿瘤的新型标志物。根据相关报道显示，多种肿瘤患者血液中的肿瘤M2-PK 浓度都出现了升高的情况，这与肿瘤的侵袭与生长有着极为密切的联系[1-2]。基于此，本文分别对结肠癌患者、结肠腺瘤患者以及正常人血浆中的肿瘤M2-PK 进行了系列的检测分析，并与癌胚肮原（CEA）检测结果进行了详细的比较。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取本院2017 年3 月1 日—2019 年6 月1 日经病理诊断确诊为结肠癌的50 例患者与结肠腺瘤的60 例患者分别设为结肠癌组与结肠腺瘤组，选择90 例健康人设为正常组。其中，结肠癌男28 例，女22 例，年龄在37 ～83 岁，平均年龄为（65.0±13.0）岁；Dukes 分 期：A 期2 例，B 期12 例，C 期26 例，D 期10 例；有淋巴结转移32 例，无淋巴结转移18 例。结肠腺瘤组男31 例，女29 例，年龄在39 ～79 岁，平均年龄为（65.5±12.0）岁。正常组男49 例，女41 例，年龄35 ～85 岁，平均年龄为（65.7±14.0）岁。

1.2 方法

1.2.1 样本采集 当天采集三组研究对象空腹状态下的静脉血4 mL，将其均匀混合置入乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝管，进行离心处理，3 000 r/min，之后收集血浆样本保存至冰箱。同时也要准确记录结肠癌患者术后肿瘤的基本资料，并实施Dukes 分期[3]。

1.2.2 肿瘤M2-PK 测定 应用酶联免疫吸附试验（ELISA）对三组研究对象的M2-PK 浓度进行检测，试剂盒是由德国ScheBoBiotech 公司生产与提供的。采用缓冲液将各组冻存分离的血浆实施解离，按照1 ∶100 的比例进行稀释，采用ELISA 法测定血浆肿瘤M2-PK 值[4-5]。同时，要采用微粒子免疫法对结肠癌组患者的外周血CEA 数值经常测定。

1.3 统计学分析

以SPSS 20.0 软件处理数据，计量资料采用t检验，计数资料采用χ2检验，P＜0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 三组血浆肿瘤M2-PK 检测水平

结肠癌组患者血浆肿瘤M2-PK 的平均水平为（46.39±5.68）（12.28 ～77.55）U/mL，结肠腺瘤组患者的血浆肿瘤M2-PK 的平均水平为（8.02±1.64）（3.61 ～16.23）U/mL，正常组患者血浆肿瘤的M2-PK 平均水平为（7.49±1.84）（2.44 ～16.97）U/mL，三组间数据比较，结肠癌组的血浆肿瘤M2-PK 水平高于结肠腺瘤组与正常组（P＜0.05），但结肠腺瘤组与正常组患者相比差异无统计学意义（P＞0.05）。

2.2 结肠癌组血浆肿瘤M2-PK 水平

通过数据比较可知，与Dukes A+B 期、Dukes C 期相比，Dukes D 期患者的血浆肿瘤M2-PK 平均水平更高（P ＜0.05），且与Dukes A+B 期相比，Dukes C 期患者的血浆肿瘤M2-PK水平更高（P＜0.05）。淋巴结转移患者的血浆肿瘤M2-PK水平高于无淋巴结转移患者（P＜0.05），差异具有统计学意义。见表1。

2.3 结肠癌组肿瘤M2-PK 与CEA 检测敏感性、特异性与阳性预测值比较

结肠癌组的血浆肿瘤M2-PK 诊断敏感性为80.8%（42/52），特异性为96.0%（190/198），阳性预测值为84.0%（42/50）；而CEA 的诊断敏感性为57.1%（40/70），特异性为94.4%（170/180），阳性预测值为80.0%（40/50）；比较数据可知，血浆肿瘤M2-PK 的敏感性、特异性与阳性预测值均高于CEA，其中，敏感性比较差异具有统计学意义（P＜0.05），特异性与阳性预测值比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

表1 结肠癌组血浆肿瘤M2-PK 水平（U/mL，±s）

表1 结肠癌组血浆肿瘤M2-PK 水平（U/mL，±s）

指标 Dukes 分期 淋巴转移A+B 期 C 期 D 期 有 无M2-PK 21.55±5.35 51.37±5.22 70.47±5.78 57.22±5.45 21.45±5.19

3 讨论

在当前背景下，我国结肠癌的早期诊断仍旧处于一个较为滞后的水平。据临床统计数据显示，约有1/3 的结肠癌患者在明确诊断时，病情已经发展到进展期。针对于这种情况，积极探究出一种不具备侵入性[6]，但却快速、经济、方便、有效的检测方法对于结肠癌的早期筛查与诊断具有十分重要的意义。

与正常增生细胞相比，肿瘤细胞的代谢状态具有较大的不同。这主要是由于肿瘤细胞的糖酵解与谷氨酞胺降解能力较强，可以为肿瘤细胞在血供差，或者是葡萄糖与氧供强烈变化环境下的生存提供十分有力的条件[7]。而这一过程离不开多种酶与同工酶的共同参与，丙酮酸激酶（PK）发挥着非常重要的作用，而同工酶则可以分为四种不同的类型，在一般情况下，其存在形式主要表现为酶的活性四聚体，此次研究中的M2-PK 一方面可以从二聚体形式转化为四聚体形式，由弱活性转化为强活性（反之亦可），另一方面还能够在一定程度上抑制细胞的死亡[8-9]。除此之外，当人体出现恶性肿瘤时，由于肿瘤组织内的部分癌蛋白基因可以加快M2-PK 由四聚体型向二聚体型的转化，因此一旦体内发生肿瘤，就会伴随M2-PK 亚型的转化情况发生，而四聚体型减少，甚至消失[10]；二聚体型也会相应的表达上调，此过程中的二聚体型M2-PK 也就是指肿瘤M2-PK[11]。

此次研究结果表明，与结肠腺瘤组相比，结肠癌组肿瘤M2-PK 水平更高（P＜0.05），且与正常组相比，结肠癌组肿瘤M2-PK 水平更高（P＜0.05），但结肠腺瘤组与正常组相比肿瘤M2-PK 水平无差异（P＞0.05）；与结肠癌组Dukes A、B 期患者相比，Dukes C、D 期患者肿瘤M2-PK 水平更高（P＜0.05），且与无淋巴转移者相比，淋巴转移者M2-PK 水平更高（P＜0.05）。从结肠癌诊断敏感性来看，肿瘤M2-PK为80.8%，CEA 为57.1%，前者更高。该结果提示，临床上通过血浆肿瘤M2-PK 可以更加诊断结肠癌，且与CEA 相比具有更高的敏感性，与肿瘤的临床病理分期有着十分密切的联系，可以为疾病的进展监测提供有价值的参考依据[12-13]。

综上所述，肿瘤M2-PK 在结肠癌的临床诊断过程中具有较高的敏感性，可以作为结肠癌早期筛查与诊断的一种高效检测手段。在本次研究中，由于研究样本数量有限，因此在今后相关方面的研究中还需要纳入更多的病例，从而使研究结论更具普遍性。另外，随着我国分子生物技术水平的不断提高，为相关临床研究提供了一个诊断及治疗结肠癌的新途径，在未来的发展过程中可以在肿瘤M2-PK 检测基础上通过筛查检测癌基因突变，为我国肿瘤的早期临床诊断与治疗提供更加可靠的途径与方法。