左后东

(医学影像四川省重点实验室，川北医学院附属医院放射科，四川 南充 637000)

软骨损伤是一种多病因、多机制导致的慢性关节疾病，以关节疼痛、变形及功能障碍为主要表现，治疗不及时或治疗效果不理想，最终会发展为骨关节炎，严重影响患者的生活质量。研究[1]表明，关节软骨损伤是关节退变及骨性关节炎的始动环节。多种因素可导致关节软骨损伤，如年龄、肥胖、生活环境、不合理或过量运动等。值得注意的是，由于缺乏血管和神经，关节软骨一旦损伤则很难自行修复。目前软骨损伤治疗方法包括关节置换、软骨移植等[2]，但这些治疗方法远期效果不甚理想，甚至会加重患者的痛苦。因此实现安全、可持续软骨修复的同时又能保持良好软骨功能特性就显得意义重大，这也是目前临床和患者的迫切需求。骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)具有向多种细胞分化的潜能，其中包括软骨细胞转化[3]。研究[4-5]表明，骨形态生成蛋白(bone morphogenetic protein，BMP)及转化生长因子-β(transforming growth factor β，TGF-β)在软骨发生、成熟、再生、结构完整性、软骨内平衡等方面发挥关键作用。本研究拟通过BMP和TGF-β家族成员中的BMP-7和TGF-β3联合作用，探索其在体外诱导干细胞分化为软骨细胞和组织的作用。

1 材料与方法

1.1 材料

比格犬干细胞(Cat.No.CAXMX-01001，苏州赛业生物科技公司)，完全培养基(Cat.No.CAXMX-90011，苏州赛业生物科技公司)，BMP-7(Cat.No.HEOPP-02102，苏州赛业生物)，TGF-β3(ab217402，abcam，UK)，兔抗II型胶原蛋白抗体(15943-1-AP，Proteintech)，CL594标记的山羊抗兔IgG抗体(SA00006-4，Proteintech)和比格犬软骨细胞(Cat No：DOG-iCell-s003，上海赛柏康)。

1.2 方法

1.2.1 干细胞的分化培养 在37 ℃、5%CO2和饱和湿度的条件下用购买比格犬干细胞提供的完全培养基培养比格犬干细胞。……