李璐璐1，关昕睿1，王子璇1，郭晓玉1，穆英丽1，解佳1，陈立功1★，王学静1,2★

（1.河北农业大学动物医学院，河北保定071001；2.河北省畜牧兽医研究所，河北保定071000）

2020 年11 月， 河北某养殖场初生仔猪发生呕吐、腹泻，为了确定其病因，对该场发病仔猪进行了临床症状观察、病理学剖检、腹泻病毒分子生物学诊断和细菌学诊断，初步判定该场仔猪发生了猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）和大肠杆菌的混合感染，现将结果汇报如下。

1 发病情况

2020 年11 月初河北某养殖场初生仔猪开始发生呕吐、腹泻，主诉发病仔猪为该养猪场产房3～10 日龄仔猪， 其中3～7 日龄仔猪发病率为100%，死亡率为75%～100%；8～10 日龄仔猪发病率为60%，死亡率为20%～30%。

2 临床症状

发病仔猪主要表现为水样腹泻和排黄色稀便，部分仔猪哺乳后发生呕吐， 发病后2～3 天后开始脱水，脱水严重个体在昏迷中死亡。

3 剖检病变

取3 头病死猪剖检病变主要为消瘦。 腹股沟淋巴结、颌下淋巴结和肠系膜淋巴结呈红褐色（3/3）。胃内有未消化奶块，胃黏膜瘀血（3/3）。 小肠腔内充满黄色稀薄液体（3/3）。部分仔猪肾脏见针尖大小出血点（1/3）。其他脏器未见肉眼可见病变。

4 腹泻病毒分子生物学诊断

取腹泻死亡仔猪的小肠和肠系膜淋巴结等组织，立即进行研磨。 研磨病料经8000 转/分钟4℃离心2分钟， 提取离心后上清液中病毒RNA，然后进行反转录，取cDNA 分别进行PEDV、 传染性胃肠炎病毒（Transmissible gastroenteritis virus，TGEV）、 猪 轮 状 病 毒 （Porcine rotavirus，PoRV） 及 猪 丁 型 冠 状 病 毒（Porcine deltacoronavirus，PDCoV） 的PCR 扩增。PCR 产物经2% 琼脂糖凝胶电泳， 结果表明腹泻仔猪病料呈PEDV 阳性（见图1），呈TGEV、PoRV和PDCOV 阴性（电泳图略）。

5 细菌学检测

取小肠内容物分别接种于麦康凯琼脂培养基平板、伊红美蓝培养基平板和十六烷三甲基溴化铵琼脂培养基平板，37℃培养24～48 小时。……