张海燕，孙丽慧，潘洪明，李林，廉洁，于晶，郎尉雅

齐齐哈尔医学院基础医学院组胚教研室,黑龙江 齐齐哈尔 161000

乳腺癌是全球女性最常见的恶性肿瘤，是女性癌症疾病导致死亡的最主要原因。据统计，2018 年有超过200 万例新发病例，约占女性癌症总数的四分之一[1]。乳腺癌的发生与性激素水平、转录因子的异常调控、细胞增殖与凋亡的异常调控等多种因素密切相关[2]。

曲古抑菌素A(TSA)隶属异羟肟酸类化合物，是目前被认为最有效的组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitors，HDACIs)之一。研究表明，TSA 具有抗卵巢癌、肺癌细胞、前列腺癌等肿瘤的能力，可抑制细胞增殖，其发生机制可能与调控下游相关信号通路基因表达有关[3～5]。以往TSA 抗肿瘤作用多集中于对肿瘤细胞增殖的作用的影响，而TSA对乳腺癌细胞凋亡作用的机制研究尚不十分明确。本研究通过体外培养乳腺癌MDA-MB-231 细胞，采用MTT 法、流式细胞术与Western Blot 法、RT-PCR 半定量检测等方法探究TSA 对乳腺癌MDA-MB-231 细胞增殖和凋亡作用的影响及其分子作用机制，为乳腺癌寻找和开发新的治疗方法提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

乳腺癌MDA-MB-231 购自于中国科学院上海细胞库；抑制剂SP600125 购自于CSN 公司；DMEM 高糖培养基，胎牛血清、胰蛋白酶均购自于Gibco 公司；RIPA 裂解液、BCA 蛋白浓度测定试剂盒购自碧云天生物技术有限公司；曲古抑菌素A、四甲基亚唑蓝(MTT)、DMSO、DAPI 购自美国Sigma 公司；细胞周期染色液、Annexin V/PI 细胞凋亡检测试剂盒购自BD公司；一抗Cyclin D1、P21、Cdk4、Caspase-3、Bcl-2、Bax、MAPK 家族抗体试剂盒、磷酸化MAPK 家族抗体试剂盒，购自美国Cell Signaling 公司；辣根过氧化物酶标记山羊抗兔二抗、辣根过氧化物酶标记山羊抗小鼠二抗、ECL 显影液购自BIO-RAD 公司；……