龙生根，章志琴，黄志辉，夏雷震，唐亮，伍琼芳，黄欧平

江西省妇幼保健院 1.妇科肿瘤，2.辅助生殖中心，3.妇科，南昌 330006

反复自然流产（recurrent spontaneous abortion，RSA）又称习惯性流产，是指连续发生两次及以上的妊娠20 周以内妊娠损失，发病率为1%～5%，60%以上原因不明，称为不明原因复发性流产（unexplained recurrent spontaneous abortion，URSA），RSA 是全世界共同关注的疑难杂症[1～3]。E003 即瑞香素（daphnetin）作为我国首创的天然药物，其药理作用十分广泛，主要包括：抗炎、抗氧化、抗病原微生物、抗肿瘤、免疫调节等[4～8]，但其在流产方面的作用尚未见任何报道。本研究通过观察RSA 模型小鼠蜕膜组织形态和超微结构，首次探讨瑞香素对RSA 模型小鼠的可能治疗作用。

1 材料和方法

1.1 实验动物

将雌性CBA/J 与雄性BALB/c 小鼠按2：1 合笼交配建立正常妊娠小鼠模型，雌性CBA/J 小鼠与雄性DBA/2 小鼠按2：1 比例合笼交配建立RSA 小鼠模型，检出阴栓者计为妊娠第0 d。实验共分4 组：正常妊娠组、RSA 模型组、E003 低剂量组（1 mg·kg-1·day-1）、E003 高剂量组（4 mg·kg-1·day-1），每组10 只雌鼠。

1.2 实验方法

1.2.1 RSA 模型小鼠制备及大体胚胎观察 各组从妊娠第0 d 开始灌胃给药，E003 高剂量组和低剂量组灌胃容积均为0.4 ml/20 g[9]，正常妊娠组和RSA 模型组给予相同体积蒸馏水，连续给药14 d，末次给药1 h后处死小鼠，打开腹腔，暴露子宫，观察子宫生长情况，记录胚胎着床数目和胚胎吸收数目并取其蜕膜组织。

1.2.2 苏木精-伊红（HE）染色 分离蜕膜组织，4%多聚甲醛溶液内固定24 h，水洗，固定，脱色，包埋，切片，经HE 染色后BX51 荧光显微镜观察。

1.2.3 透射电镜标本制备 新鲜组织确定取材部位，组织体积≤1 mm×1 mm×1 mm，迅速投入电镜固定液4 ℃固定2～4 h。0.1 mol/L 磷酸缓冲液PB（pH 7.4）漂洗3 次，每次15 min；……