袁 亮，高炟鹏，嵇 晴

0 引 言

脓毒症患者出院后会出现不同程度的远期认知障碍及心理缺陷[1-2]；且早期炎症反应会增加未来患阿尔茨海默病的风险[3]。但机制有待进一步阐明。蛋白质组学技术如同位素标记相对或绝对定量(iTRAQ)的发展极大地提高了疾病的检测能力，现已广泛用于探索各种疾病的分子标记和机制[4]。尽管目前通过对单个基因或蛋白质的研究已经揭示了炎症引发神经行为异常的各种机制，但尚缺乏对海马蛋白组学进行系统分析。因此，本研究旨在探讨LPS暴露后导致的远期神经行为改变及其机制，为炎症致远期认知功能损伤的防治提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物与分组选取雄性C57BL/6小鼠90只3～4月龄，体重29～35 g，由东部战区总医院比较医学科提供[实验动物合格证号：SYXK(军)2017-0037]，饲养于湿度50%，温度25 ℃，12 h灯照的环境中，自由摄水，饮食。所有小鼠随机分为：等渗盐水组(对照组，n=20)、LPS组(LPS组，n=40)与LPS + Roscovitine(LPS+R组，n=40)。对照组小鼠腹腔注射等渗盐水(10 mL/kg)；LPS组小鼠腹腔注射LPS(5 mg/kg)；LPS+R组腹腔注射LPS(5 mg/kg)。所有小鼠注射完成后饲养12个月。对照组和LPS组在行为学检测完成后，取海马组织，采用iTRAQ技术寻找发挥重要作用的蛋白靶点。在行为学检测前3 d开始直至行为学检测结束当天，LPS+R组每天腹腔注射Roscovitine(20 mg/kg)；对照组和LPS组每天腹腔注射等量等渗盐水。

1.2旷场实验利用旷场实验评估实验动物的运功能力和焦虑样行为。实验在安静的环境中进行，将小鼠放入实验箱(50 cm × 50 cm × 40 cm)中自由探索5 min并进行摄像。记录其探索运动总路程以及在中央格停留的时间。……