miRNA-206在乳腺癌中的表达及与内分泌耐药相关性研究*
2021-04-17莫军扬张敏敏卢林捷韦业刚覃舒婷
莫军扬,张敏敏,唐 茜,卢林捷,陈 岩,韦业刚,覃舒婷
(广西柳州市人民医院普外三科,柳州 545006)
微小RNA(mi RNAs,miR)是一种内源性非编码RNA,具有抑癌基因或类癌基因的功能,影响恶性肿瘤的发生发展。最近研究发现,miRNA在乳腺癌的诊断、预后、耐药等多方面起了重要作用[1-2]。本研究运用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测乳腺癌患者癌组织中miR-206 的表达,探讨其与患者临床特征、激素受体之间是否存在相关性,以期能成为一种新的预测患者预后及内分泌治疗敏感度的标记物。
1 资料与方法
1.1 研究对象
收集2014年1月~12月于广西柳州市人民医院普外三科住院、治疗完整的100例女性乳腺癌患者的肿瘤组织标本,患者年龄39~61 岁,平均(50.08±10.85)岁;所有患者均按WHO乳腺肿瘤分类标准进行病理学分型,其中TNM 分期分为I 期25例,Ⅱ期56例,Ⅲ期19例;无淋巴结转移48例,有淋巴结转移52例;病理类型:浸润性导管癌95例,中分化腺癌1例,小叶癌2例,导管内癌2例。所有患者在采集组织标本前均未经放、化疗治疗,且无炎症等合并症。
1.2 主要试剂
Hipure FFPE miRNA Kit 提取分离试剂盒购自广州Magen 公司;ReverTra Ace ToYoBo qPCR RT Kit 反转录试剂盒购自上海ToYoBo 公司;PCR 采用KAPA Probe Fast qPCR Master Mix试剂盒购自北京KAPA公司;定量PCR仪购自上海安捷伦公司,型号Mx3005P。
兔抗人雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,RP)一抗购自美国Cell Signaling;羊抗兔二抗、多聚甲醛、石蜡、柠檬酸缓冲液和苏木精等免疫组化试剂购自北京中杉金桥生物技术公司。
1.3 实验方法
1.3.1 miR的提取与miR反转录 miR的提取按照Hipure FFPE miRNA Kit操作说明提取;miR反转录按照ReverTra Ace ToYoBo qPCR RT Kit 操作说明进行。qPCR 反应:上游引物分别为U6F、miR206,下游引物共同为miR27-R。……
