气管切开法铜绿假单胞菌肺部感染动物模型的建立及评价*
2021-04-17李夏霖黎俊康韦丽霜李金垄
李夏霖,黎俊康,韦丽霜,李金垄,王 可,闫 萍
(广西医科大学第一附属医院,南宁 530021)
铜绿假单胞菌(PA)属于一种广泛存在的机会致病菌,常引起各种急、慢性感染,其中以肺部感染多见,常见于慢性阻塞性肺病(COPD)、支气管扩张、囊性纤维化(CF)等结构性肺病的患者[1]。PA可以形成生物膜,进而保护细菌免受宿主免疫和抗菌药物的清除[2]。PA 肺部感染发病机制复杂、治疗棘手,为研究该病,许多PA肺部感染动物模型已经被建立[3]。本实验在国内、外学者经验的基础上,使用改良低熔点琼脂糖包裹PA,以气管切开方式注入大鼠肺部,建立大鼠PA肺部感染模型,并根据细菌学、病理学特点和炎症因子含量来对模型进行评价分析,从而为PA 肺部感染的研究提供理想的动物模型。
1 材料与方法
1.1 菌株 PA标准菌株PAO1,由丹麦哥本哈根大学医院临床微生物科惠赠。
1.2 实验动物 6~8 周龄健康清洁级雄性SD 大鼠36只,体重190~210 g,由广西医科大学实验动物中心提供,动物使用许可证号:SYXK桂2020-0004;动物生产许可证号:SCXK桂2020-0003。所有大鼠置于SPF 级无菌动物房内,分笼饲养,自由饮水、摄食。本研究动物实验已通过广西医科大学实验动物中心伦理审查委员会审批。
1.3 主要试剂与仪器 磷酸缓冲盐溶液(PBS)、LB营养琼脂、LB肉汤(北京索莱宝科技有限公司);1%琼脂糖(美国BIO BASIC公司);3%戊巴比妥钠、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-17A 酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒(武汉华美公司)。超低温冰箱(Thermo 995);生物安全柜(苏净安泰);生化培养箱(恒宇SPX-300-11);磁力搅拌器(德国IKA)。
1.4 实验分组与处理 将36只大鼠随机分为实验组和对照组,每组18只。……
