贺倩 李岩 邓为民

肺癌是常见的肺部恶性肿瘤，严重威胁着人类的健康。全球范围内，肺癌的发病率在持续上升。根据组织病理学特征，肺癌可分为小细胞肺癌（small cell lung cancer，SCLC）和非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC），而NSCLC 占肺癌发病率的80%～85%［1］。目前，治疗NSCLC 的主要手段是手术结合放疗和化疗，而NSCLC患者的5年生存率仍然很低，NSCLC的侵袭、转移和多药耐药是其临床治疗的主要难题，也是影响患者预后和导致死亡的主要原因［2］。因此，亟需探讨NSCLC进展的新机制。

泛素结合酶E2O（UBE2O）是一种E2 泛素偶联酶，可与E3 泛素连接酶组合，同时具有两者的活性［3］。UBE2O 通常在哺乳动物组织中表达，在脑、心脏、骨骼肌和肝脏中含量较高［4］。相关研究报道，在骨形态发生蛋白信号传导过程中，UBE2O 介导SMAD6泛素化，并抑制TRAF6 K63多聚泛素化，进而抑制NF-κB 信号传导［5-6］。UBE2O 还可以通过泛素化转录因子BMAL15来调控生物节律功能［7］。目前，已有多项研究显示，UBE2O 在许多恶性肿瘤中高表达，且在肿瘤发生发展过程中发挥了重要作用［8-10］。有研究表明，UBE2O在乳腺癌中高表达，且其表达水平与乳腺癌患者肿瘤转移侵袭和临床不良预后密切相关，UBE2O 表达的下调能够抑制肿瘤的增殖［11］。然而目前，UBE2O 在NSCLC 细胞中的生物学功能和作用机制报道较少。本研究采用RNA 干扰技术对UBE2O 基因进行特异性沉默，以抑制NSCLC 细胞内UBE2O 蛋白的表达，探讨UBE2O 蛋白表达下调在调控NSCLC细胞侵袭、迁移过程中的作用及相关机制。

1 材料与方法

1.1 材料

小牛血清购自杭州四季青生物工程材料有限公司，DMEM培养液购自美国Gibco公司，Transwell培养小室购自美国Millipore公司，Trizol（总RNA抽提试剂）购自上海碧云天生物试剂有限公司，脂质体Lipofect 2000购自美国Invitrogen公司，胰酶购自美国Sigma公司。……