miR-105-5p靶向XAF1抑制宫颈癌细胞迁移和侵袭的机制
2021-04-15艾恒玲苗慧赵欢陈佳权牡丹江医学院附属第二医院妇产科黑龙江牡丹江157000
艾恒玲 苗慧 赵欢 陈佳权 (牡丹江医学院附属第二医院妇产科,黑龙江 牡丹江 157000)
宫颈癌是女性生殖系统常见恶性肿瘤,靶向治疗是其治疗方式之一〔1〕。micoRNA(miRNA)在细胞的增殖、分化和凋亡过程中发挥着重要功能,且大量研究证实miRNAs在宫颈癌的转移和分化中扮演重要角色,可用作宫颈癌靶向治疗的靶标〔2〕。研究发现miR-105在胃癌组织中明显高表达,促进胃癌细胞增殖,增强其细胞活力、迁移能力,抑制其凋亡〔3〕。miR-105过表达能促进肝癌细胞G0/G1期阻滞,抑制肝癌细胞增殖〔4〕。在筛选差异表达miRNA时发现miR-105-5p在宫颈癌细胞中上调表达〔5〕,但其对宫颈癌细胞迁移、侵袭等生物行为的影响及其机制目前还不清楚。XAF1是促凋亡的肿瘤抑制因子,拮抗X-连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)抗细胞凋亡作用的蛋白,在多种人类癌症中失活或下调表达,过表达XAF1可诱导凋亡、抑制增殖〔6〕。XAF1在宫颈癌组织中下调表达,促进其表达会抑制宫颈癌发生及发展过程〔7〕。本文旨在研究miR-105-5p对宫颈癌细胞迁移和侵袭的影响及其机制是否与XAF1有关。
1 材料与方法
1.1材料 宫颈癌细胞HeLa、SiHa和正常宫颈细胞Ect1/E6E7购自中国科学院上海细胞库;RPMI1640培养基购自美国Gibico公司;双荧光素酶报告基因检测试剂盒购自北京Solarbio公司;荧光定量试剂盒购自日本TaKaRa公司;Transwell小室、Matrigel购于美国BD公司;RIPA蛋白裂解液、SDS-PAGE试剂盒购自上海碧云天生物技术有限公司。
1.2方法
1.2.1细胞培养与分组 宫颈癌细胞HeLa、SiHa和正常宫颈细胞Ect1/E6E7使用含10%胎牛血清的RPMI1640培养基;取对数生长期细胞HeLa,将其分为miR-NC组(转染miR-NC)、miR-105a-5p组(转染miR-105a-5p mimics)、anti-miR-NC组(转……
