王海珍 王丽娟 贠云飞

(1唐山市协和医院中医科，河北 唐山 063000；2唐山市迁西县人民医院骨科)

骨质疏松是一组以骨量减少、骨微结构退化为主要特点的代谢性骨病变，患者多伴有腰背痛且骨脆性增加极易发生骨折，严重影响患者生活质量〔1〕。成骨细胞是调节骨形成和骨重建过程的重要功能性细胞，能特异性分泌多种生物活性物质，促进骨基质形成和骨组织矿化，是预防和治疗骨质疏松的重要靶点〔2，3〕。葛根素是从中药葛根中提取的单体成分，具有雌激素样作用，对成骨细胞增殖和分化具有促进作用〔4，5〕。但目前葛根素促进成骨细胞增殖、分化的具体机制还不清楚。miRNA是一类内源性非编码小分子RNA，通过调节靶基因转录后表达影响多种生物学过程，包括细胞增殖、分化和凋亡等〔6〕。相关研究报道〔7〕，miR-196a-3p能够调控骨质疏松易感基因的单核苷酸多态性(SNP)功能位点，与骨矿物质密度有关，提示miR-196a-3p可能在骨质疏松发病中发挥潜在作用。本研究以大鼠成骨细胞CP-R091为研究对象，观察miR-196a-3p和不同浓度葛根素对成骨细胞增殖和分化的影响，并探讨葛根素影响miR-196a-3p表达促进大鼠成骨细胞增殖和分化的潜在作用机制。

1 材料与方法

1.1细胞株和主要试剂 大鼠成骨细胞CP-R091(武汉普诺赛生命科技有限公司)；葛根素(中国药品生物制品检定所，纯度96.0%)；胎牛血清(HyClone公司)；DMEM培养液(Gibco公司)；LipofectamineTM 2000转染试剂(北京索莱宝生物科技有限公司)；四甲基偶氮唑蓝(MTT)粉末(Sigma公司)；二甲基亚砜(Sigma公司)；TRIzol试剂(北京天根生化科技有限公司)；……