张元杰,吴佩玲,王倩云,买热叶木姑·艾沙,阮晓慧

(新疆医科大学第二附属医院口腔科,乌鲁木齐 830063;*通讯作者,E-mail:295923650@qq.com)

牙周病是口腔中常见的炎症性疾病之一,导致牙槽骨吸收,最终使牙齿脱落,所以在牙周病的治疗中,恢复缺损的牙槽骨依旧是研究的热点内容之一。近年来,随着对新型支架材料和干细胞的研究,为牙周组织再生提供了新的思路。GO因其优异的理化性质,成为组织工程领域研究与应用的热点。其作为石墨烯的衍生物之一,具有良好的生物相容性和亲水性[1],高的机械强度,大的接触面积等特性[2],在组织工程领域展现出应用潜力。国内外学者研究发现,GO超过一定浓度对细胞产生毒性作用[3-6],但对低浓度GO是否能够促进间充质干细胞增殖与成骨分化得出的结论不同[7]。

hPDLSCs作为牙源性干细胞的一种,具有多向分化潜能,本课题组[8,9]前期研究发现,hPDLSCs表现出了明显的增殖和成骨分化能力,是牙周组织再生的理想的种子细胞。本研究拟通过体外实验,将hPDLSCs与不同浓度GO共培养,探讨GO对hPDLSCs的增殖及成骨分化能力的作用。

1 材料和方法

1.1 主要试剂和仪器

氧化石墨烯分散液(江苏先锋纳米);澳洲胎牛血清(Gibco,美国);维生素C;β-甘油磷酸钠;地塞米松;茜素红染色液(索莱宝生物,北京);细胞计数试剂盒(博士德生物,武汉);逆转录试剂盒(Thermo,美国);实时荧光定量聚合酶链反应试剂盒(QIAGEN,德国)。

实时荧光定量PCR仪(Life-Tech,美国);酶标仪(Thermo,美国);荧光倒置显微镜(Leica,德国);超净工作台(苏州净化);恒温水浴箱(上海一恒科技);正置显微镜;倒置显微镜(Leica,德国);低温高速离心机(Eppendorf,德国)。……