龚意辉 吴志蒙 李论 彭淑君 李鹏 陈致印

龚意辉（1988-），博士，主要从事园艺产品保鲜技术研究工作，主持或作为主要成员参与湖南省自然科学基金项目“漆酶在柑橘褐斑病中的作用机制”、湖南省教育厅科学研究项目“基于宏基因组学探讨EGCG@β-CD纳米粒增强降血脂功效的途径及机制”和“漆酶在黄桃褐变中的作用”等科研项目3项;在《Food Chemistry》《Plant Physiology》《Postharvest Biology and Technology》《Food Chemistry Molecular Science》《International Journal of Molecular Sciences》《南方农业学报》《包装工程》《食品与发酵工业》等国内外期刊发表学术论文18篇，其中第一作者或通讯作者11篇（SCI收录期刊3篇）。

摘要：【目的】克隆柑橘漆酶基因（CsLAC）并分析其表達规律，为进一步完善柑橘褐斑病的发生机制提供理论依据。【方法】以甜橙为试验材料，利用液相色谱—质谱联用（LC-MS）技术分析柑橘褐斑病发生过程中主要酚类化合物的变化，并采用实时荧光定量PCR分析漆酶基因在柑橘褐斑病发生过程中的表达规律。【结果】PE包装明显降低甜橙果实褐斑指数，利用LC-MS技术在甜橙果皮中共检测到1191个差异离子，共鉴定出18种酚类物质，其中没食子酸（Gallic acid）、儿茶素（Catechin）、表没食子儿茶素（Epigallocatechin）和原花青素B2（Procyanidin B2）的含量在果实贮藏期间呈下降趋势。成功克隆出7个柑橘漆酶基因，CsLAC4、CsLAC6、CsLAC11、CsLAC12、CsLAC13、CsLAC15和CsLAC17全长片段长度分别为1674、1716、1689、1740、1740、1713和1743 bp，分别编码557、571、562、579、579、570和580个氨基酸残基，与参考序列的相似性分别为99.88%、99.83%、99.70%、99.71%、99.60%、99.59%和99.89%。系统发育进化树显示，CsLAC15与荔枝LcLAC的氨基酸序列相似性较高（64.7%），CsLAC12与苹果MdLAC7的氨基酸序列相似性较高（65.7%）。氨基酸保守序列结果表明柑橘漆酶氨基酸序列含有漆酶的3个典型铜离子结构域，分别为Cu-oxidase-3、Cu-oxidase-1和Cu-oxidase-2。CsLAC4、CsLAC6、CsLAC11和CsLAC17在甜橙果实贮藏期间呈上调表达，CsLAC12和CsLAC15在果实贮藏期间总体上呈下调表达。……