付 林，陈远华，于 震，王 华，赵 卉，徐德祥

(1.安徽医科大学第二附属医院，呼吸与危重症医学科，安徽 合肥 230041; 2.安徽医科大学公共卫生学院，安徽 合肥 230031)

胎儿宫内生长受限(fetal intrauterine growth restriction，IUGR) 是指胎儿未能达到其遗传决定的全部生长潜能[1]。IUGR不仅与死胎风险的增加有关，同时也是造成围产期胎儿高发病率和死亡率主要原因[2]。维生素D (vitamin D，VD)是一种甾体类固醇激素，近年来母体孕期维生素D缺乏(vitamin D deficiency，VDD)与IUGR的关系受到越来越多的关注，流行病学发现孕期VDD增加了IUGR的发生风险[3]，但是机制不清。因此，本研究旨在通过低维生素D饲料喂养构建VDD诱发IUGR孕鼠模型，并从胎盘糖皮质激素屏障功能方面探讨VDD诱发IUGR的可能作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物和试剂本研究所用小鼠均为SPF级CD-1小鼠，购于北京维通利华公司，实验动物许可证号：SCXK(京)2017-0012。4周龄雌鼠体重(19～21)g，饲养在恒温恒湿环境中，自由饮水和进食，维持恒定昼夜节律。适应性喂养1周以后，随机均匀分成对照组(CTRL组)和维生素D缺乏组(VDD组)。正常饲料和低维生素D饲料购买于南京特洛菲公司。糖皮质激素试剂盒购买于武汉华美生物公司。小鼠11β-HSD2引物由上海生工技术有限公司合成。一抗购于美国Abcam公司。

1.2 动物模型的制备实验动物随机分为2组：对照组(CTRL组)、维生素D缺乏组(VDD组)，每组雌鼠40只。CTRL组小鼠喂养标准饲料(VD含量>800 IU·kg-1)，VDD组小鼠饲养在无紫外光照的房间中，并喂以低维生素D饲料(VD含量<25 IU·kg-1)。饲养5周以后，每组随机取6只雌鼠，异氟烷麻醉小鼠，摘眼球取血、脱臼处死小鼠，检测血清中25-(OH)-D水平。剩余36只雌鼠与正常雄鼠交配，在妊娠d 16剖杀6只孕鼠，留取胎盘；在妊娠d 19剖杀剩余孕鼠，观察妊娠结局。

1.3 蛋白免疫印迹取胎盘匀浆，吸取上清液并离心，吸取上清液250 μL，煮沸变性，所得即为胎盘总蛋白。接……