陈 勇， 邓 美， 邹 飞， 彭 拓， 傅 饶， 张 洋

重庆三峡医药高等专科学校附属医院 泌尿外科，重庆 404100

肾细胞癌(renal cell carcinoma，RCC)是肾常见的肿瘤之一，约占所有成人恶性肿瘤的3%[1]。约有1/3的RCC患者在诊断时已发生转移，且对放化疗不敏感，预后较差[2]。深入分析RCC的生物学标志物并寻找潜在治疗靶点，对早期诊治并改善生存预后有重要价值。miRNA与细胞增殖、分化、侵袭和凋亡等生物学行为密切相关，在肿瘤发生和发展中起到重要作用[3-4]。miRNA对肿瘤的早期诊断、治疗和预后评价有一定价值[4]。miRNA-592在多种癌症中异常表达，如miRNA-592在肝癌组织中低表达，可能通过靶向DEK基因抑制肝癌细胞的增殖[5]；在胶质瘤组织中低表达，通过靶向IGFBP2抑制胶质瘤细胞的增殖与侵袭，促进凋亡[6]。但也有研究表明，miRNA-592在结直肠癌细胞中高表达，抑制其表达可降低癌细胞的增殖和迁移[7]。本研究检测RCC组织和细胞中miRNA-592的表达，通过沉默miRNA-592观察细胞增殖与凋亡的变化，并分析miRNA-592与RCC预后的关系。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验试剂 DMEM培养基和胎牛血清购于上海复祥生物科技有限公司，反转录试剂盒与2×SYBR Green PCR Mastermix试剂盒购于美国Sigma公司，引物均由广州伯信生物科技有限公司设计并提供，BCA蛋白定量试剂盒和十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)快速制备试剂盒购于上海语纯生物科技有限公司，CCK-8试剂盒和凋亡检测试剂盒购于上海语纯生物科技有限公司，Cyclin B1、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)和GAPDH内参抗体购于美国Sigma公司，Bax和Cleaved caspase-3抗体购于英国Abcam公司。正常人肾上皮细胞系(HK-2)和人RCC细胞系(786-O、ACHN、Caki-1和769-P)购于中科院上海细胞库。……