张 雨，崔东倩，刘 倩，韩陈陈，罗婷婷，马 旸，魏 伟

胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1，IGF-1)是IGF家族成员，可与胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor 1 receptor，IGF1R)结合并参与肿瘤的发生发展。研究表明IGF-1可以促进黑色素瘤细胞转移；还可通过上调早期生长反应蛋白1(early growth response 1, EGR1)的表达增强肝癌(hepatocellular carcinoma，HCC)细胞的迁移和侵袭能力。胰岛素样生长因子结合蛋白2(insulin-like growth factor binding protein 2，IGFBP2)是循环系统中含量第二大的IGFBPs。IGFBP2结构中含有IGF结合区域，可在循环中与IGF形成复合物并调节IGF功能。IGFBP2可通过调控IGF/IGFR信号通路促进肿瘤进展，但IGFBP2在IGF-1诱导肝癌细胞增殖、迁移和侵袭中的作用尚未有报道。

该研究选用不同浓度IGFBP2与IGF-1联合刺激HepG2细胞，用CCK-8法检测细胞增殖，transwell法检测细胞迁移和侵袭，Western blot检测胞内信号通路相关蛋白的活化和表达，旨在揭示IGFBP2在IGF-1诱导HepG2细胞增殖、迁移和侵袭中的作用及机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1

主要试剂 高糖DMEM、胎牛血清购自美国Biological Industries公司；胰酶购自美国Wisent Inc公司；BCA蛋白浓度测定试剂盒购自上海Bestbio生物公司；CCK-8试剂盒购自日本DOJINDO公司；Elk1、磷酸化Elk1、Akt、磷酸化Akt、p44/42 MAPK (ERK1/2)、磷酸化p44/42 MAPK (ERK1/2)、EGR1、磷酸化IGF-1R抗体均购自美国Cell Signaling Technology公司；β-actin、HRP偶联抗兔和小鼠IgG购自北京中杉金桥生物技术有限公司；Transwell小室购自美国Corning公司；24孔板购自美国NEST公司；0.5%结晶紫染色液、PBS缓冲液购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

1.1.2

细胞株的培养 人源HCC细胞株HepG2购自美国American Type Culture Collection公司，以2×10个/ml密度接种于细胞培养瓶中，用含10%胎牛血清的DMEM置于5% CO、37 ℃培养箱中培养。

1.2 方法

1.2.1

CCK-8法检测HepG2细胞增殖能力 将对数生长期的HepG2细胞，用胰蛋白酶消化，配制成细胞悬液并调整细胞密度为5×10个/ml。取100 μl细胞悬液接……