骨髓染色体制片方法探讨
2021-04-03周婷婷王双阁李雨艳
中国保健营养 2021年4期
陈 超 周婷婷 王双阁 路 放 李雨艳
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物种的染色体组型在一定程度上具有该物种的特异性,并可在细胞层面上表现出该物种的进化过程。伴随对染色体研究的不断深入,科学家期望利用先进技术,使染色体内部结构分化染色,以获得更具有特征鉴别功能的信息。骨髓细胞染色体实验室制片方法具体包括秋水仙素处理、收集细胞、低渗处理、预固定、离心、再固定、再离心、制作细胞悬液、滴片、染色干燥、去浮色、镜检等步骤[1]。实验操作较为简单,但影响因素较多,如操作不当将不能获得足够的细胞中期分裂相。因此,本文对实验室骨髓制片方法进行分析,实验操作条件严格控制,对某些易错方法进行改善,以期有效提高实验成功率、提高标本中骨髓细胞中期分裂相。
1 秋水仙素处理
秋水仙素(又名秋水仙碱),是从百合科植物秋水仙中提取出的一种生物碱,可抑制细胞进行有丝分裂,使染色体形态停留在分裂中期。细胞分裂相的多少、形态等是进行染色体研究的前提,传统活体秋水仙素处理方法需要提前数小时甚至一天对实验动物注射秋水仙素,但通过对制备的标本进行观察发现染色体形态并不理想,难以进行染色体的细致观察;而另一种传统制备方法——血细胞体外培养法虽可获得良好的染色体形态,但是需将血液细胞在体外无菌条件下培养3~5d,周期长,要求条件高[2]。两种方法均有一定局限性,而对骨髓细胞进行体外短时间培养的同时进行秋水仙素处理可简化操作步骤和缩短试验周期,且该方法制作的染色体标本分裂相多、形态良好。……
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