林留霞，桂成坤，李莲瑞，2*

（1.塔里木大学动物科学学院，新疆阿拉尔 843300；2.塔里木畜牧科技兵团重点实验室，新疆阿拉尔 843300）

绵羊无浆体病是在绵羊和山羊体内由专性寄生的蜱传性的血液传染病，旧称边虫病[1-2]，广泛存在于热带和亚热带地区，温带地区也有少量分布[3]。1983年，马玉良等[4]首次在新疆发现绵羊无浆体感染，随后辽宁、内蒙古、甘肃、陕西、宁夏、青海、河南、山东、四川等地区[5-9]相继出现绵羊无浆体的报道。该病主要破坏动物的红细胞，绵羊感染该病后出现消瘦、贫血、黄疸等临床症状，造成生长发育缓慢、料重比增高、急性感染时甚至会导致动物死亡[10]。目前，基层地区检测绵羊无浆体病的主要方法有吉姆萨染色法，但吉姆萨染色法只能在动物感染后16～22 d 检出虫体，检出率低。因此，本试验采用巢式PCR 法，通过MSP4基因和16S rRNA 基因设计并合成引物，进行无浆体病感病率检测，并对数据进行统计分析，进行流行病学调查，进而为南疆地区绵羊无浆体病的防控工作提供参考。

1 材料与方法

1.1 样品采集

对南疆4个地区637只绵羊进行一次性无菌颈静脉采血并编号，保存于4 ℃恒温箱中备用。阳性样品由河南农业大学兽医寄生虫学实验室馈赠。南疆4地区采样地点分布及采样数量见表1。

1.2 试验试剂与仪器

试剂：Gold view 染料购自苏区金唯智生物科技有限公司；d NTP Mixture 购自北京全式金生物技术有限公司；DL2000 Marker购自北京华大生物科技有限公司；Agarose购自北京沃比森科技有限公司；全血DNA 快速提取试剂盒购自北京华大生物科技有限公司。……