惠明朗 姜翠菊 邱海涛 刘磊峰

(1.广东医科大学附属医院耳鼻咽喉头颈外科，广东 湛江 524000；2.深圳市中西医结合医院耳鼻咽喉科，广东 深圳 518104)

鼻咽癌是常见的头颈部恶性肿瘤之一，近年的发病率逐年升高，目前鼻咽癌治疗手段以放疗结合药物为主，虽能对局部有较好的控制，但一部分患者在4年内仍会发生远处转移，一旦出现转移，预后极差[1-2]。因此，探讨有效的鼻咽癌治疗方法尤为重要。miR-1275是miRNAs家族一员，其可靶向HOXB5抑制鼻咽癌细胞增殖，阻滞细胞周期[3-4]，但miR-1275对鼻咽癌细胞凋亡及机制影响尚未明确。胰岛素样生长因子1受体(Insulin like growth factor 1 receptor，IGF-1R)是一种酪氨酸激酶跨膜蛋白，参与细胞增殖、侵袭、凋亡、分化等一系列病理生理过程。目前研究[5-7]证实，在鼻咽癌、乳腺癌、结直肠癌等多种肿瘤中IGF-1R存在过表达，其异常活化可促进肿瘤增殖，抑制肿瘤细胞凋亡，介导细胞的远处转移。miR-1275是否可调节IGF-1R影响鼻咽癌细胞增殖、凋亡尚未清楚。本研究以鼻咽癌HONE-1细胞为研究对象，旨在探讨miR-1275和IGF-1R对鼻咽癌细胞增殖、凋亡的影响及机制，为鼻咽癌诊疗提供新的研究靶点。

1 材料方法

1.1 试剂和仪器 人鼻咽癌细胞株HONE-1购自美国ATCC，FBS、RPMI 1640培养基、双抗均购自美国Gibco，miR-1275 mimics、对照miR-NC、miR-1275 inhibitor、对照anti-miR-NC、IGF-1R特异性siRNA及阴性对照均购自上海吉玛制药技术有限公司，Opti-MEM培养基、LipofectamineTM2000试剂盒均购自美国Invitrogen公司，Trizol、MTT试剂盒、PCR仪、酶标仪均购自美国Thermo公司，细胞凋亡试剂盒、流式细胞仪均购自美国BD，IGF-1R、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化的蛋白激酶B(p-AKT)、细胞增殖核抗原(PCNA)和活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)抗体及HRP标记的二抗均购自美国Abcam。……