薛伶俐 曾艳 方川 程维 李雅冬

(重庆医科大学附属第一医院颌面外科,重庆 400016)

化疗药物是治疗恶性肿瘤的方法之一[1]，但是疗效不理想[2]。因此仍需我们继续寻找更为有效的药物，而筛选出有效药物的第一步就是体外药敏试验[3-4]。我们在前期的研究中发现，微管蛋白酪氨酸连接酶类似物12(tubulin tyrosine ligase like 12，TTLL12)可以抑制微管蛋白和硝基化酪氨酸的结合，从而抑制硝基化酪氨酸的细胞清除作用，使得头颈鳞癌Hep-2细胞可以继续存活下去。因此TTLL12具备潜在癌基因的功能[5]。假设我们能够发现某种药物可以抑制TTLL12的功能，那么硝基化酪氨酸就可以顺利地与微管蛋白结合在一起，形成的硝基化酪氨酸微管蛋白可以促使肿瘤细胞死亡。目前已知能够影响细胞微管功能，且具有抗癌作用的临床常用的药物是紫杉醇(paclitaxel)[6]，其作用是使微管聚合，妨碍微管的解聚[7]。紫杉醇已经应用于临床，并对头颈鳞癌有较好的治疗效果，因此我们将紫杉醇做为对肿瘤有效的阳性对照。随机选取一种化合物噻丙烯(Thiirene)，在Pubmed及维普、万方等数据库未查到噻丙烯与肿瘤相关的研究，因此我们将噻丙烯作为对肿瘤无作用的阴性对照。本研究基于这一思路，建立了一种既可以筛选出有效的抗癌药物，又可以明确药物具有以上作用机制的体外药敏试验方法，具体试验方法如下。

1 材料与方法

1.1 主要材料和试剂 TTLL12过表达Hep-2细胞株，MEM培养液，紫杉醇，噻丙烯，硝基化酪氨酸，辣根过氧化物酶标记硝基化酪氨酸……