许明星 郑传东 杨鹏 杨娜

(成都市第三人民医院 1.麻醉科；2.病理科，四川 成都 610031)

心肌缺血是指心脏的血液灌注减少导致心脏的供氧减少，心肌能量代谢不正常，不能支持心脏正常工作的一种病理状态；心肌缺血与多种心血管疾病的发生、发展密切相关，严重危害人类身体健康[1-2]。研究[3]表明麻醉药对心肌细胞损伤具有保护作用，如七氟醚对心肌具有保护作用；丙泊酚可减轻高糖缺氧对心肌细胞的损伤[4]。硫喷妥钠可减轻缺血后大鼠海马脑片神经元的损伤[5]，也可减轻再灌注心律失常[6]，但具体机制尚不清楚。miRNAs在心血管系统疾病如心肌梗死、肥大、纤维化、心力衰竭、心律失常、炎症和动脉粥样硬化等病变组织中有差异表达，可能影响疾病的进程[7-8]。研究[9]显示，miR-664-1-5p在缺氧预处理大鼠心肌细胞中表达水平降低，可能参与缺氧介导的心肌细胞保护作用。基于以上研究结果，本研究假设，硫喷妥钠通过调控miR-664-1-5p在缺氧大鼠心肌细胞损伤中发挥保护作用。本课题以大鼠心肌细胞H9c2为研究对象，建立氯化钴(CoCl2)缺氧模型，研究硫喷妥钠对CoCl2诱导的H9c2细胞存活、凋亡的作用，及miR-664-1-5p在该保护机制中的作用。

1 材料与方法

1.1 材料 大鼠心肌细胞H9c2购自北京北纳创联生物技术研究院，胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)和高糖DMEM培养基购自美国Gibco公司，硫喷妥钠、氯化钴(CoCl2)、胰蛋白酶、购自Sigma-Aldrich公司，BCA蛋白检测试剂盒和CCK8检测试剂盒购自上海碧云天生物技术有限公司，双染色流式法细胞凋亡检测试剂盒购自BD公司，丙二醛……