程虎 陈婷婷 亚力·亚森 吴建江

(新疆医科大学第一附属医院麻醉科，新疆 乌鲁木齐830054)

七氟醚(sevoflurane，Sev)具有快速诱导麻醉，对肝、肾功能影响小及稳定的血液动力学等特点，在麻醉中广泛使用；Sev后处理对心肌细胞具有保护作用，其对糖尿病(diabetic mellitus，DM)患者心肌细胞的保护作用显著减弱[1-2]。线粒体动力相关蛋白1(dynamin-related protein 1，Drp1)被激活后募集在线粒体表面，并促进线粒体分裂。研究[3]发现，抑制Drp1可以减轻DM小鼠心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion，I/R)损伤。磷脂酰肌醇激酶3(phosphatidylinositol-3-kinase，PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B，AKT)相关通路在I/R中发挥重要作用。研究[4]显示促进PI3K/AKT通路可以保护DM大鼠的心肌细胞。本文主要分析Drp1通过PI3K/AKT通路对DM大鼠Sev后处理心肌细胞凋亡的影响，并探究其机制。

1 材料与方法

1.1 主要材料和仪器 健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠(12周，220～250 g，上海斯莱克实验动物中心，中国)。链脲佐菌素(streptozotocin，STZ)(Sigma公司，美国)。Drp1 抑制剂 Mdivi-1 (Med Chem Expres公司，美国)。生化试剂盒、酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒和TDT介导的dUTP-生物素缺口末端标记(TUNEL)试剂盒(碧云天公司，中国)。小动物呼吸机(Inspira ASV，哈佛仪器公司，美国)。BL-420F小动物生物功能实验系统(成都泰盟科技有限公司，中国)。Mayer's苏木精和0.5%曙红水溶液(H8070，DH0050，北京Solarbio公司，中国)。RIPA裂解缓冲液(中国，北京，Beyotime)、二喹啉甲酸(bicinchoninic acid，BCA)试剂盒(武汉博斯特生物技术有限公司，中国)、抗体购自美国Abcam公司、聚偏氟乙烯(PVDF)膜(Bio-Rad公司，美国)、显微镜(Olympus 公司，日本)。

1.2 大鼠分组、建模和干预方法 将60只大鼠随机分为假手术(Sham)、I/R、I/R+DM、I/R+DM+Sev、I/R+DM+Sev+Mdivi-1、I/R+DM+Mdivi-1组6组。其中I/R+DM、I/R+DM+Sev、I/R+DM+Sev+Mdivi-1、I/R+DM+Mdivi-1组通过腹腔注射STZ(60 mg·kg-1，pH=4.5)建立糖尿病模型，Sham组仅接受等量柠檬酸盐缓冲液(0.1 mol·L-1)腹腔注射。在STZ注射后第72 h后用生化试剂盒测量血糖，72 h时尾静脉空腹血糖(FBG)水平高于16.7 mmol·L-1证明DM模型建立成功。……