卢玉润 李英 胡涛 唐宇帆 何秋蓉

(1.四川省医学科学院·四川省人民医院老年内科，四川 成都 610072；2.四川大学华西公共卫生学院·四川大学华西第四医院检验科，四川 成都 610041)

缺血性心脏病是一种高发病率和高死亡率的临床常见疾病，心肌供氧不足所导致的心肌损伤是缺血性心脏病发生的重要因素之一，降低心肌耗氧量和/或增加心肌供氧的抗缺血疗法被证实是治疗缺血性心脏病的重要策略[1-4]。因此，寻找和开发有效的保护心肌细胞免受缺氧损伤药物对缺血性心脏病的治疗和预防具有重要意义。蒽醌类化合物大黄酚提取自中药大黄，具有抗炎、抗氧化和抗癌的药理作用[5-7]。研究[8-9]显示，大黄酚对缺血再灌注损伤的小鼠脑组织和缺血缺氧刺激的海马神经元等具有保护作用。然而，大黄酚在缺氧诱导的心肌细胞中是否具有保护作用及其机制并不清楚。氯化钴(CoCl2)是体外模拟心肌缺氧损伤常用的诱导剂[10-11]。本研究构建CoCl2诱导的心肌细胞系H9c2缺氧损伤模型，旨在阐述大黄酚对缺氧诱导的心肌细胞损伤的保护作用及其机制。

1 材料与方法

1.1 主要材料 大鼠心肌细胞系H9c2(上海美轩生物科技有限公司)，大黄酚(四川省维克奇生物科技有限公司，纯度≥98%)。DMEM/F12培养基(美国Gibco公司)，MTT试剂和二甲基亚砜(美国Sigma公司)，LDH试剂盒(南京建成生物工程研究所)，Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒(碧云天生物技术研究所)。兔抗鼠Bax、Bcl-2和GAPDH抗体(美国Santa Cruz公司)，兔抗鼠Cleaved caspase-3抗体(英国Abcam公司)，HRP标记的山羊抗兔IgG抗体(北京中杉金桥生物公司)。……