汪 锋， 王 超， 赵懿琛

(1.贵州大学生命科学学院/农业生物工程研究院， 贵阳 550025；2.贵州大学茶学院， 贵阳 550025； 3.贵州省农业科学院， 贵阳 550006)

杜仲(Eucommiaulmoides)是我国特有的单科、单属、单种的古老孑遗植物，素有植物“活化石”之称[1-2]。杜仲也是我国一种名贵的中药材，通常以皮入药[3]，药用成分主要包括苯丙素类(phenylpropanoids)、环烯醚萜类(iridoids)、木脂素类(lignans)等化合物[4-5]，其中，木脂素及其衍生物因具有较强的生理活性。研究表明，木脂素及其衍生物的高活性与植物细胞内糖基转移酶(glycosyltransferase,GT,EC 2.4.x.y)介导的木脂素糖基化密不可分[6-7]，而GT是一类催化受体分子进行糖基化修饰的酶[8]。该酶通常可以核苷酸活化的糖为糖基供体，特异性识别糖基受体，并在特定位点上催化糖苷键的形成，是植物次生代谢过程中一类重要的结构修饰酶[9]，调节植物体内的多种生理功能[10-11]。因此，研究植物中糖基转移酶基因的功能对进一步了解GT蛋白在植物代谢及对植物细胞响应胞内外适应性的调节等具有十分重要的意义。本研究以杜仲为材料，利用同源克隆从杜仲cDNA中克隆EuGT2基因，利用生物信息学分析预测杜仲GT蛋白功能，同时对该基因的表达模式进行分析，为深入研究和探讨杜仲糖基转移酶在杜仲生长发育过程及应答外界环境中的功能和作用提供理论参考。

1 材料与方法

1.1 实验材料

杜仲来源于贵州大学农业生物工程研究院的杜仲种植园，E.coliDH 5α菌株保存于贵州大学农业生物工程研究院实验室。植物总RNA提取试剂盒Fruit-mateTMfor RNA purification、RNAiso Plus、限制性核酸内切酶KpnⅠ、限制性核酸内切酶XbaⅠ、IPTG、pMD 20-T Vector、TaqDNA Polymerase、感受态细胞制备试剂盒均购于Takara公司；……