张伟 王加顺 郭文涛 梁福平 周晓伦

(甘肃医学院，甘肃 平凉 744000)

植物促生菌是一类自由生活在土壤或根系周围的有益微生物,植物促生菌能通过产生植物生长激素如IAA,促进植物根系中侧根和不定根的生长,从而促进植物对环境中矿物元素和营养的吸收[1]；通过产生ACC 脱氨酶能降低乙烯的前体物质ACC 的浓度,从而降低植物逆境胁迫(旱涝、重金属胁迫、高盐环境等) 下乙烯的浓度水平[2]。从污染的土壤中原位分离土著植物促生菌强化植物修复,不仅使本土物种能够更好地适应当地特定环境,而且能够尽量避免非本土化的生态风险[3]。通过测定菌株的促生特性(IAA、ACC 脱氨酶活性),进一步挑选具有较好促生能力的菌株,结合16S rDNA 序列分析和生理生化试验结果鉴定细菌种属,以期得到一批优良的土著植物促生菌。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 土壤采集

样品采集于甘肃省平凉市曹湾村(E106.90281°、N35.486647°) 大田农作物豌豆根际土壤。

1.1.2 主要材料化学药品等级均为分析纯,由西安姚北生物科技有限公司提供。黄豆种子为农家精选优良品种。

1.2 试验方法

1.2.1 根际土壤细菌的分离

准确称取3 份土壤各10g,分别加入盛有90mL 无菌水(含有20～30 个玻璃珠) 的锥形瓶中,置振荡器上振荡15min,得到10-1浓度的土壤稀释液,连续稀释至10-11,将10-1～10-11梯度的土壤稀释液均匀地涂布于含有50mg·L-1Cr6+的LB 培养基中,35±2℃倒置培养3～5d。挑取形态特征不同的菌落划线在LB 培养基中继续培养,每种菌株连续纯化分离3 代以上,最终使平板上的菌落形态和镜检的菌体形态一样,将纯化的菌落划线至牛肉膏蛋白胨琼脂斜面,4℃保藏,以备后续研究。……