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鸡骨骼肌卫星细胞的分离培养与鉴定

2021-03-30宋瑞龙张远浩顾建红卞建春刘学忠

畜牧兽医学报 2021年3期
关键词:生长方法

戴 巍,宋瑞龙,张远浩,邹 辉, 顾建红,袁 燕,卞建春,刘学忠*

(1. 扬州大学兽医学院,扬州225009; 2. 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心, 扬州 225009; 3. 扬州大学 教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室,扬州 225009)

骨骼肌卫星细胞(muscle satellite cell,MSC)又称为肌源性干细胞,位于肌纤维肌膜和周围细胞外基质之间,即基底膜(ECM)处[1]。细胞呈扁平纺锤形或梭形,在正常条件下,肌肉卫星细胞处于静止的待激活状态,当受到外界各类刺激后被激活,修复损伤。因此,肌肉卫星细胞对骨骼肌再生和生长起着至关重要的作用。

骨骼肌卫星细胞起源尚不完全清楚,目前有两种假说:第一种为体节来源假说,即卫星细胞起源于胚层内体节来源的细胞中,这种假说被证实于鹌鹑胚胎试验[2];第二种为非生肌来源假说,De Angelis等[3]将分离胚胎背部主动脉得到的细胞移植到小鼠中,可参与肌肉再生。但成熟骨骼肌卫星细胞可以同时表达出两种标记物, 且骨骼肌卫星细胞存在异质性,表明两种起源可能都是存在的[4]。

骨骼肌卫星细胞移植作为一种治疗多种再生性疾病(肌营养不良、心力衰竭等)的手段,目前已被广泛研究[5]。因此,高纯度骨骼肌卫星细胞作为移植细胞及基因治疗工程细胞在临床上具有良好的应用前景。然而,由于其干细胞的特性,MSC含量仅占总肌细胞的2%~5%,且目前,MSC分离纯化往往需要使用细胞分选仪,操作复杂且代价较高[6],实验室分离方法一般为组织贴壁法和单双酶解法,但其耗时长、细胞存活率低、保存性差。……

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