吉 琳，杨秋月，方斐旻，窦 虹，郁建锋，徐 璐，顾志良

(常熟理工学院生物与食品工程学院,苏州 215500)

载脂蛋白B(apolipoprotein B，Apob)是血浆中低密度脂蛋白(low density lipoproteins，LDL)和极低密度脂蛋白(very low density lipoprotein，VLDL)的主要蛋白质成分[1]。哺乳动物的Apob主要由肝和小肠合成，在脂类代谢、胆固醇转运[2]、吸收代谢等过程中发挥重要作用。Apob异常与冠心病[3]、糖尿病[4]、脂肪肝[5]、代谢综合症[6-8]等疾病的发生相关性较高，同时也是评估动脉粥样硬化风险的重要指标之一[9-10]。另外，近年来在家禽上的研究表明，Apob基因不仅在家禽能量代谢[11]、生长繁殖[12]、脂质代谢[13-14]等生命活动中发挥重要作用，而且可作为家禽选育的分子遗传标记。

CRISPR(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)技术作为第三代基因编辑工具，相较于锌指核酸酶技术(zinc-finger nucleases，ZFNs)[15]和类转录激活效应因子技术(transcription activator-like effector nucleases，TALENs)[16]，具有短时高效、价格实惠、靶向特异性强等优点。并且可同时靶向多个基因，因而在大量研究中被广泛应用。自CRISPR系统发现以来，科学家不断探索将其从细胞分裂与增殖的基本生物学研究应用到癌症[17-19]、精神病[20]和糖尿病[21-22]等疾病的研究，为疾病的治疗提供了新思路和新方向。Schmitt等[23]运用CRISPR/Cas9系统在Vemurafenib敏感的细胞中敲除NES(Nestin)证明，Nestin与黑色素瘤细胞获得性Vemurafenib耐药有关。Gao等[24]通过CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除突变Tmc1基因，保留正常Tmc1基因，成功修复了小鼠模型的显性突变并缓解了听力丧失。随着更多Cas系统的开发，该系统在各种遗传性神经疾病[25]的治疗中也存在巨大的潜力。在植物研究领域，编码CRISPR/Cas系统的载体以往主要是通过农杆菌转化或基因枪轰击的方法导入植物细胞，应用于作物改良。……