刘彩玉 杨丽亚 田冬梅

[关键词]萝卜硫素;人皮肤鳞状细胞癌;凋亡;增殖;lncRNA MALAT1/TFEB信号通路;机制

皮肤鳞状细胞癌（Skin squamous cell carcinoma，SSCC）是最常见的皮肤癌，仅次于基底细胞癌，占全球已知皮肤癌的20%～50%[1]。手术治疗只对早期或已确诊的SSCC患者有效，而对伴发其他疾病和使用免疫抑制剂或抗凝剂的老年患者不适合手术治疗，还会对患者外貌带来不良影响[2-3]。因此，寻找高效、低副作用的新型抗肿瘤药物迫在眉睫。萝卜硫素抗肿瘤活性的研究更加受到重视，并且其还具有防治皮肤癌和光防护作用，主要包括预防皮肤炎症、红斑、皮肤上皮细胞氧化应激损伤、光老化及皮肤肿瘤等[4]，其中对黑素瘤细胞增殖具有明显的抑制作用[5]。然而，关于萝卜硫素对人皮肤鳞状细胞癌细胞增殖的药理抑制作用研究甚少，于是本文探讨了萝卜硫素对A431细胞增殖和凋亡的影响。

1 材料和方法

1.1 主要材料：人皮膚鳞状细胞癌A431细胞株（上海ATCC细胞库）;DMEM培养液、胎牛血清、胰蛋白酶（Gibco公司）;CCK-8试剂盒（Solarbio公司）;RIPA裂解液（杭州四季青公司）;BCA蛋白定量试剂盒（北京康为世纪）;Annexin V/FITC细胞凋亡试剂盒（北京四正柏生物公司）;Caspase-3/9活性检测试剂盒（Solarbio公司）;兔抗鼠t-PARP、cle-PARP、cle-Caspase-3、TFEB、TFEB（Ser142）及β-actin抗体（美国CST公司）;羊抗兔IgG二抗（上海谷歌生物公司）;ELC化学发光检测试剂盒（Advansta）。

1.2 主要仪器：BIORAD-550型酶标仪（美国伯乐公司）;BBS-V800型单人超净台（山东鑫贝西公司）;SPX-250型细胞培养箱（美国Thermo公司）;GE-100型凝胶电泳仪（北京六一仪器厂）;Amersham Imager 600仪器（BIORAD，美国）;FACSCalibur型流式细胞仪（美国BectonDickinson公司）。

1.3 A431细胞培养：采用含10%胎牛血清和1%抗生素的的DMEM培养基对A431细胞进行培养，培养箱条件设置为5%CO2、37℃恒温。……