杨柏 赵伟铎 张静

（1.烟台海关技术中心 山东烟台 264000；2.烟台海关）

1 前言

PCR检测技术能使微量DNA发生大幅增加，在动物疫病检测环节应用该技术，能无限放大动物DNA片段，为动物疫病防治工作提供有利依据。但是运用PCR技术检测动物疫病时，一旦实验室受到污染，就会对检测结果的准确性产生影响。因此，有必要详细梳理动物疫病PCR检测实验室的污染源，针对性地采取有效对策加以防控，不断改善实验室环境，提高检测质量。

2 动物疫病PCR检测实验室的污染原因

2.1 试剂污染

PCR试剂受到污染是造成PCR污染的关键原因之一，因为试剂在实验操作中属于基础性实验耗材，科学规范地存储和使用试剂，能够有效减少试剂在实验操作中所接触的污染物。如果在配置PCR试剂过程中，出现操作不当情况，就可能使加样枪、双蒸水、容器或其它相关溶液受到PCR核酸模板的污染。

2.2 PCR扩增产物受污染

PCR扩增产物受污染也是造成PCR污染的一项常见的、重要的污染问题。由于PCR产物具有极高的拷贝量，并且相应量远高出PCR检测的多个拷贝极限，即便受污染的PCR产物是极其微量的，都可能成为实验室的污染源，并在较大程度上破坏实验室环境，从而出现假阳性，影响实验结果的准确性[1]。

2.3 样本交叉污染

样本间出现交叉污染也是引发PCR污染的关键因素，如果在储存实验标本过程中，不能做到密封严密或选用错误的密封方法，就会造成样本间发生交叉感染。另一种客观原因是储存实验标本的容器受到污染，如样本容器外部附着标本引发交叉感染，或人为提取样本核酸模板时操作不当使移液枪受到污染等[2]。……