多重RT-PCR与毛细电泳联用技术在儿童下呼吸道感染病原体检测中的应用*
2021-03-26冯星星贺晓丽
冯星星,李 明,贺晓丽
云南省昆明市儿童医院/云南省儿童重大疾病研究重点实验室:1.检验科;2.呼吸内科;3.云南省儿科研究所,云南昆明 650028
急性下呼吸道感染(ALRTI)是临床儿童最为常见的感染性疾病,病原学复杂,对儿童健康造成严重威胁,其中病毒是婴幼儿和学龄前儿童最为主要的ALRTI病原[1]。在儿童ALRTI中明确感染的病原体,对于疾病早期诊断和特异性抗病毒治疗,选择合理治疗方案非常重要。目前,国内实验室开展检测较多的是采用直接免疫荧光法(DFA)检测7种常见的呼吸道病毒抗原:呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、甲型流感病毒(InfA)、乙型流感病毒(InfB)、副流感病毒1、2、3(PIVⅠ、PIVⅡ、PIVⅢ),但是在ALRTI中常见的鼻病毒(HRV)、冠状病毒(HCOV)和近年来新发现的偏肺病毒(HMPV)、博卡病毒(HBOV)等也被证实是引起儿童呼吸道感染的重要病原,这几种病毒均不能采用DFA进行常规检测。为了满足临床诊治的需要,近年来核酸检测技术的应用成为呼吸道病原体外诊断的新方向,采用多重RT-PCR技术可同时检测RSV、HRV等在内的13种呼吸道病原体,因此,本研究应用多重RT-PCR技术和DFA同时对38例儿童ALRTI痰液标本进行呼吸道病原体检测,比较两种方法的检测结果,探讨多重RT-PCR技术在儿童ALRTI检测中的临床价值。
1 资料与方法
1.1一般资料 选取2019年12月至2020年1月昆明市儿童医院因呼吸道感染收治入院患儿38例。其中男22例,女16例,年龄12 d至7岁。收集其痰液标本38份。
1.2仪器与试剂 3500Dx基因分析仪和PCR基因扩增仪是购自美国ABI公司;Olympus-BX65荧光显微镜购自Olympus公司;13种病原体多重检测试剂盒是购自宁波海尔施科技有限公司,各病毒扩增核酸片段大小信息见表1;……
