沈 燕，李英辉，王 军，梁 姣，黄豫晓，朱卿昊，吴兴安，赵 亚

脑型疟是非洲等恶性疟流行区儿童以及我国输入性疟疾病例死亡的常见原因[1-2]，其发病机制与免疫细胞在脑部聚集引起中枢神经系统（central nervous system,CNS）炎症性病理损伤密切相关[3-4]。研究发现，小胶质细胞是一类组织定居巨噬细胞，其活化方式直接决定其神经保护/损伤作用[5-7]。目前研究认为，小胶质细胞是单核细胞在胚胎发育早期迁入脑内分化而成的巨噬细胞，因其形态或表面标志物缺乏特异性，所以难以将其与外周巨噬细胞有效区分[8-10]。本研究拟根据小胶质细胞CNS定居的特点，结合实验型脑型疟（experimental cerebral malaria,ECM）小鼠病程动态变化规律，利用血脑屏障（blood brain barrier,BBB）作用从空间上将小胶质细胞和外周巨噬细胞区分，通过ECM小鼠炎性相关分子表达量改变筛选活化标志物；通过比较感染后不同时间点脑内小胶质细胞的表达谱，寻找脑型疟小胶质细胞活化的分子标志，为研究小胶质细胞在脑型疟颅内炎症反应中的作用提供新的思路和方法。

1 材料与方法

1.1 材料 伯氏疟原虫ANKA株（Plasmodium berghei ANKA strain,PbA）为本实验室保存虫种。C57BL/6小鼠购于空军军医大学实验动物中心。伊文思兰（Evans blue,EB）试剂和Giemsa染液购于碧云天生物技术公司。甲酰胺试剂购于默克公司。RPMI1640培养基购于Hyclone公司。RNA提取试剂RNAiso Plus、反转录试剂盒PrimeScript RT Master Mix kit和实时荧光定量PCR（real time quantitative PCR,RT-qPCR）荧光试剂购于TaKaRa公司。Percoll试剂购于GE公司。流式抗体FITC标记的CD11b和PE标记的CD45购于达科为生物技术公司。荧光染色抗体CD45、BrdU、IBA-1分别购于Abcam公司、CST公司和赛维尔生物科技公司。……