刘函西，吕浩，郭广雨，刘冬旭，石岩，孙志君，张泽鑫，张艳娇，文莹楠，王洁琦，刘春燕，陈庆山，辛大伟，王锦辉

大豆根瘤菌HH103突变对结瘤能力的影响

刘函西1，吕浩1，郭广雨2，刘冬旭1，石岩1，孙志君1，张泽鑫1，张艳娇1，文莹楠1，王洁琦1，刘春燕1，陈庆山1，辛大伟1，王锦辉1

1东北农业大学农学院，哈尔滨 150030；2哈尔滨农业科学院，哈尔滨 150028

大豆是重要的经济作物，能够为人类提供大量的植物蛋白和油脂。大豆在生长过程中，能够与根瘤菌形成共生体系进行共生固氮，该形式的共生固氮能够将空气中的氮气还原成氨，为大豆生长发育提供丰富氮源。根瘤菌Ⅲ型分泌系统是根瘤菌中重要的蛋白分泌结构，能够通过分泌Ⅲ型效应因子在共生体系建立过程中发挥重要调控作用。根瘤菌编码一种ATP转移酶，是根瘤菌Ⅲ型分泌系统的重要组成部分，能够保障根瘤菌Ⅲ型效应因子向宿主细胞的正常分泌。【】探索突变情况下对根瘤菌结瘤能力的影响，提高大豆-根瘤菌共生体系的固氮效率，为大豆农业生产提供必要的参考和支持。通过三亲杂交和同源重组，在起始密码子ATG下游插入了一个抗性基因，利用PCR扩增和Southern blot对插入情况进行验证，从而构建插入突变体HH103ΩrhcN。利用大豆染料木苷（Genistin）对野生型根瘤菌HH103及HH103ΩrhcN突变体进行诱导，并对处理组合对照组进行胞外蛋白纯化，通过Western blot检测突变对根瘤菌III型效应因子NopC及NopT分泌的影响。利用双层钵植物培养系统对大豆Williams82进行野生型根瘤菌HH103和HH103ΩrhcN突变体接种，分析突变对根瘤表型的影响。……