张 爽，张巍巍，李 颖，马红梅，冯宝立，张茂俊，陈 倩，王丽丽

产气荚膜梭菌(Clostridiumperfringens，C.perfringene)是一种条件致病菌，能引起人类气性坏疽和食物中毒等疾病。该菌可产生至少16种毒力因子，包括α-ν 12种毒素、肠毒素、溶血素和神经氨酸酶[1]，其中肠毒素(CPE)和β2肠毒素与胃肠道疾病密切相关[2-3]。肠聚集性大肠埃希菌(EnteroaggregativeEscherichiacoli，EAEC)是5种致泻性大肠埃希菌中的一种，曾在世界各发达和发展中国家引起散发或暴发流行[4-7]，易感染营养不良儿童和免疫力低下的人群[8]。EAEC在本地区散发病例中广泛流行[9]。

本研究对2018年北京市一起腹泻暴发事件中分离到的C.perfringens和EAEC进行病原特征分析，为此类混合感染暴发事件的实验室应对提供经验。

1 材料与方法

1.1材 料

1.1.1样本采集与流行病学调查 2018年5月7日北京市某医院肠道门诊接诊9例以腹痛、腹泻为主要症状，有共同就餐史的学生患者。所有病例均来自一个学生团，该团共15人，其中学生14人，生活老师1人，共有9名学生发病。该团成员均于5月6日晚18点在新疆乌鲁木齐就餐，晚20点乘飞机至北京。首发病例发病时间为5月7日早3点，末例病例发病时间为早8点，流行曲线为单峰曲线，呈点源传播特征。我们采集全部9名病例粪便样本送至疾病预防控制中心实验室检测。

1.1.2试剂与仪器 麦康凯琼脂(MAC)、胰胨亚硫酸盐环丝氨酸琼脂(TSC)、哥伦比亚血琼脂(北京陆桥)；细菌 DNA 提取试剂盒(德国Qiagen)；细菌、病毒实时荧光 PCR 检测试剂盒(北京卓成惠生及青岛中创)；普通PCR反应液体系液(日本TaKaRa)；限制性内切酶XbaI、SmaI(美国NEB)；革兰阴性需氧菌药敏检测板(上海星佰)；……