李 立，李江敏，王海玉，王亚东

(河南省疾病预防控制中心毒理室，河南 郑州 450016)

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，其发病率和病死率均位居女性恶性肿瘤之首。2018年，全世界约有208万例新发女性乳腺癌患者，约62万例女性肿瘤患者因乳腺癌而死亡[1]。转化生长影响因子(transforming growth-interacting factor，TGIF)是一种转录抑制因子，参与视黄酸信号通路、转化生长因子β(transforming growth factor-β，TGF-β)信号通路及Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路。既往研究表明，TGIF与白血病、肺癌、尿路上皮细胞癌和胃肠道肿瘤等多种肿瘤的发生、发展及预后有关[2-8]。研究发现，TGIF表达异常与乳腺癌的发生有关，TGIF过表达与三阴性乳腺癌患者不良结局明显相关，敲除TGIF基因可抑制小鼠乳腺肿瘤病毒(mouse mammary tumor virus，MMTV)-Wnt-1转基因小鼠乳腺癌的发生[9]。沉默TGIF基因能够抑制三阴性乳腺癌细胞的体外侵袭和迁移能力，并抑制该细胞在裸鼠体内的肺转移[10-11]，说明TGIF与乳腺癌的侵袭和转移有关。为进一步了解TGIF在乳腺癌侵袭和迁移中的生物学作用，本研究选取侵袭潜能相对较低的雌激素受体阳性人乳腺癌MCF-7细胞为模型，构建TGIF过表达细胞株，探讨TGIF过表达对人乳腺癌细胞侵袭和迁移能力的影响。

1 材料与方法

1.1 实验细胞人乳腺癌MCF-7细胞由中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库提供，液氮冷冻保存。

1.2 主要试剂与仪器达尔伯克改良伊格尔培养基(Dulbecco′s modified Eagle′s medium，DMEM)、胎牛血清、胰蛋白酶和遗传霉素(geneticin，G418)购自美国Gibco公司，辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)标记的二抗购自北京中杉金桥生物技术有限公司，Anti-Flag-HRP抗体购自美国Sigma公司，β-catenin抗体、β-肌动……