慢性阻塞性肺疾病（慢阻肺）是以气流受限持续存在为特征性病变的气道慢性炎症疾病，随着疾病的进展，肺功能进行性减退，急性发作事件增加，其中的一个重要原因是慢阻肺的气道重塑。气道重塑即气道结构的改变，主要病理改变是气管壁的增厚及气管平滑肌细胞的增殖，其主要发生机制目前认为是慢性炎症的反复破坏。Nod样受体蛋白-3（Nod-like receptor protein-3，NLRP3）近来认为在慢阻肺、支气管哮喘等疾病的持续恶化中起关键作用，它被激活是疾病发生发展的主要原因。本研究于2018年7月至2019年3月通过制备慢阻肺大鼠模型，检测外周血淋巴细胞NLRP3 mRNA相对表达量、肺泡灌洗液炎性因子水平及大鼠气管平滑肌厚度，以探讨它们间的关系。

1 材料与方法

1.1 动物

24只1月龄清洁级Wistar大鼠，体质量范围为220～250 g，购自上海斯莱克实验动物有限责任公司［许可证SCXK（沪）2017-0005］。本研究符合一般动物实验伦理学原则。

1.2 主要试剂

内毒素（西格玛公司）；SYBR

Premix Ex Taq

™Ⅱ（Tli RNaseH Plus）RR420A（TAKARA公司）；TRIzol Reagent（Ambion公司）；红梅牌香烟（红塔集团）。

1.3 主要仪器与设备

荧光定量PCR仪（LightCycler® 96）罗氏；酶标仪（MK3）Axygen公司；酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒（南京建成）；熏烟箱（自备）。

1.4 实验方法

1.4.1

模型的分组和复制 将大鼠以随机数字表法均分成空白组和慢阻肺组（各12只）。依据经典的烟熏加气管静滴内毒素方法复制慢阻肺模型。方法如下：第1、14天经气道滴入1 g/L的内毒素2 000µL，后2～30 d（第14天除外），将大鼠放入5%香烟烟雾中熏0.5 h/d。

1.4.2

苏木精-伊红（HE）染色及支气管平滑肌测量（1）石蜡切片制备。取材与固定→水洗→脱水→透明→透腊→包埋→切片→展片→捞片→贴片→烤片。……