不锈钢罐孵育系统对绵羊胚胎体外发育效果的影响
2021-03-18郭延华王立民王新华刘守仁皮文辉
草食家畜 2021年1期
郭延华,周 平,王立民,王新华,刘守仁,皮文辉
(绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室/新疆农垦科学院,新疆 石河子 832000)
哺乳动物卵母细胞和早期胚胎对环境应激非常敏感。 胚胎培养实验室内,关键设备之一是二氧化碳培养箱,配子/胚胎体外培养的大部分时间处于培养箱内。 培养箱的主要功能是为配子和胚胎发育提供稳定的环境。 为了达到这个目标,培养箱调节温度、二氧化碳水平、pH 值、氧气浓度和湿度/蒸发/介质渗透压;所有这些都会影响胚胎发育[1]。 大多数可用的二氧化碳培养箱内部面积很大,而且日常工作需要频繁开门,会扰乱箱内平衡,降低培养系统的稳定性。
为了保持单元内的环境稳定,多数实验室采用个人专用培养箱,减少分享空间,降低培养箱开门次数。 这样做法降低设备利用效率,增加固定资产投资。
Vajta 等(1997)报道潜水艇孵育系统。 将含有胚胎的组织培养皿单独包裹在不渗透二氧化碳、氧气和氮气的层压箔袋中,并填充所需的气体混合物,然后热熔封闭,浸入循环控温水浴中,以达到所需的培养期(最长7 d)。这样,所有包装好的培养皿都可以作为单独的培养箱(“潜艇”)使用。该系统的优点是温度、湿度和气体混合物稳定;打开后这些参数可快速恢复;灵活使用不同的混合气体;安全;成本低;降低污染风险;清洁问题少;运输方便[2,3]。
本文利用实验室二氧化碳传感器坏了的培养箱做恒温容器,将含有早期胚胎的组织培养皿单独放在1 L 的304 不锈钢压力罐中,并填充饱和湿度的标准混合气体,关闭开关,密闭压力罐,放入恒温箱中,达到所需要的培养期7 d。……
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