田崇瑜，段小超，陈彦华，霍乃蕊，韩克光，古少鹏，郑明学

（1.山西农业大学动物医学学院，山西太谷 030801；2.山西安弘检测技术有限公司，山西太原 030008）

鸡球虫在养殖环境中普遍存在[1]并随时可能形成循环感染[2]，严重危害养鸡业。鸡球虫病由艾美尔属球虫寄生在肠上皮细胞引发，尤以寄生在盲肠的柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella）致病性最强[3]。鸡只摄入环境中的孢子化卵囊而感染，严重时引发鸡只大批死亡，轻症或痊愈鸡生长发育受阻，对其他传染病易感，产蛋率下降、料肉比增加，并且对新城疫、法氏囊、传支等形成免疫抑制[4]。近年鸡球虫病呈现出一些新的变化[2]，表现出向小龄化发展、发病率和死亡率高、发病常年化、症状温和、耐药性增强、一般的消毒剂不起作用[5]等新的特征，给养鸡业造成重大经济损失[4]。

鸡球虫特异性抗体检测技术将促进攻虫后的抗体应答机制研究[6]和该病的免疫防控[7]。卵黄抗体防治鸡球虫病效果显著[8]，是一种无药物残留、安全可靠、绿色环保的球虫病防治新途径[9]，鸡球虫抗体检测技术的建立将有助于口服卵黄抗体制剂的研发[10]。

本研究以柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊接种雏鸡制备阳性血清和可溶性抗原，优化最佳抗原包被浓度、包被条件、最佳血清稀释度、酶标二抗工作浓度等，从而建立柔嫩艾美耳球虫特异性抗体的ELISA 检测技术，为相应试剂盒的研发奠定基础。

1 材料和方法

1.1 材料

供试40 只5 日龄健康雏鸡购自太谷某种鸡厂。柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊、部分阳性血清及纯化的柔嫩艾美耳球虫特异性IgG（13.4 μg/mL），由山西农业大学郑明学教授惠赠。……