刘静冰 李灵常 魏国利 吴夏慧 李检阅 霍介格

（南京中医药大学附属中西医结合医院肿瘤科，江苏南京210028）

肠癌是最常见的消化系统恶性肿瘤，据《2015年中国癌症数据》报道，2015 年我国结直肠癌患者新增人数超过37 万人，死亡超过19 万人，发病率和死亡率在所有恶性肿瘤中居第五位[1]。中医药在结直肠癌的治疗中发挥着日益重要的作用。复方肠泰系我院肿瘤科治疗结肠癌的经验方，由人参、薏苡仁、白花蛇舌草、莪术、八月札和藤梨根等六味中药组成。人参中的人参皂苷Rg3 是重要的抗血管生成因子，可抑制肝癌、结肠癌等多种肿瘤的新生血管生成[2-3]。课题组前期研究发现，复方肠泰通过半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）诱导结肠癌细胞SW480 凋亡，诱导自噬体活化巨噬细胞而促进抗肿瘤免疫应答，诱导HT-29 移植瘤细胞自噬和凋亡，抑制裸鼠移植瘤生长[4-5]。因此，我们推测复方肠泰可能具有抗新生血管生成作用，并与其抗结肠癌作用相关，故本研究以人脐静脉内皮细胞（HUVEC）和SCID小鼠为研究对象，探索复方肠泰对新生血管生成的影响。

1 实验材料

1.1 细胞和实验动物 HUVEC：产品编号H-007F-C，澳赛尔斯生物科技（上海有限公司）。雄性SCID小鼠：SPF级，上海斯莱克实验动物有限责任公司，许可证号为SCXK（沪）2017-0005。本研究动物伦理备案号：AEWC-20181020-55。

1.2 药物与试剂 复方肠泰，处方：人参10 g，黄芪15 g，藤梨根15 g，薏苡仁20 g，苦参6 g，八月札10 g。加10倍体积水浸泡30 min后煮2 h，药渣加8倍水再煮2 h，煎煮液100目筛网过滤，冷却后2次滤液经蒸发仪浓缩至220 mL，作为饮片水煎液，生药浓度2.50 g/mL。加磷酸缓冲盐溶液（PBS）于离心半径8 cm，10 000 r/min离心10 min后取上清液，根据不同浓度需要加入一定量的PBS稀释，使用滤器过滤除菌，4 ℃冰箱保存备用。……