卷曲蛋白8在胃癌BGC823细胞中的表达及其对胃癌细胞迁移、侵袭的影响
2021-03-16宋香妮陈瑶莉穆金姬
宋香妮,陈瑶莉,杨 剑,穆金姬
(铜川市人民医院消化内科,陕西 铜川 727000)
胃癌是常见的消化道恶性肿瘤,严重影响人们的身心健康[1-3]。近年来科学技术的进步、手术方法的改进、免疫治疗及新辅助化疗的广泛应用大大提高了胃癌患者的预后,但是胃癌患者术后5年生存率仍然较低[4-7]。胃癌细胞的侵袭和转移是胃癌患者死亡的主要原因[1],因此了解胃癌发生与发展的分子机制对胃癌的治疗及预后非常重要。卷曲蛋白8(Frizzled 8,FZD8)是Wnt家族的受体之一,是一种7次跨膜蛋白,结构类似于G蛋白偶联型受体。FZD8参与体内多种生理和病理过程,在人类肺癌、口腔癌、急性淋巴细胞白血病、前列腺癌等多种肿瘤中参与细胞增殖及恶性转移[8-10]。Demirci等[11]使用qRT-PCR方法检测到FZD8在胃癌组织中高表达,并与胃癌的转移相关。但FZD8在胃癌中的作用机制尚未完全阐明。本研究旨在检测FZD8在人胃癌细胞株BGC823细胞中的表达水平,并通过沉默人胃癌细胞株BGC823细胞中的FZD8来评价其对BGC823细胞迁移和侵袭的影响,总结其潜在作用机制。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 实验细胞:人胃癌细胞BGC823细胞和人胃黏膜上皮细胞GES1购于中国科学院上海细胞库,在含10%胎牛血清(FBS)的RPMI-1640培养液中,于37 ℃、5% CO2恒温培养箱中传代培养,细胞进入对数生长期即可收割用于实验。
1.1.2 主要试剂:Trizol试剂购自上海碧云天生物技术研究所;慢病毒(批号:JRR041B)购自中国吉凯生物有限公司;逆转录试剂盒(批号:DCR048A)购自日本Takara公司;电化学发光(ECL)系统购自康为世纪生物有限责任公司;兔抗人FZD8、β-actin抗体和羊抗兔荧光素标记的IgG抗体购自美国Santa公司;……
